جداسازي و شناسايي كلستريديوم ديفيسايل از سالاد سبزيجات آماده به مصرف از رستوران هاي تبريز به روش Real-time PCR و تعيين الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي آن

چكيده زمينه و هدف: كلستريديوم ديفيسايل (Clostridium difficile) به عنوان عامل اسهال ناشي از مصرف آنتي بيوتيك و كوليت كاذب است. سالادهاي آماده به مصرف به عنوان يكي از منابع احتمالي انتقال كلستريديوم ديفيسايل به انسان محسوب مي-شوند. هدف از مطالعه حاضر جداسازي و شناسايي كلستريديوم ديفيسايل از سالاد سبزيجات آماده به مصرف از رستوران هاي تبريز به روش Real-time PCR و تعيين الگوي مقاومت آنتي بيوتيكي آن بود. روش بررسي: اين مطالعه از نوع توصيفي – تحليلي بود. 60 نمونه از سالاد عرضه شده از رستوران هاي مناطق مختلف شهر تبريز در فاصله زماني اسفند 94 تا خرداد 95 جمع آوري گرديد. نمونه ها پس از آماده سازي و استخراج DNA، با روش Real-time PCR مورد ارزيابي قرار گرفتند. مقاومت آنتي بيوتيكي جدا شده ها به هشت آنتي بيوتيك مختلف با استفاده از روش انتشار ديسك تعيين شد. بررسي ارتباط بين شيوع كلستريديوم ديفيسايل در مناطق پنجگانه در نرم افزار آماري SPSS (ويرايش 19) با آزمون مربع كاي در سطح معني داري 05/0 > P انجام گرفت. يافته ها: نتايج حاصل از اين مطالعه نشان داد كه از 60 نمونه مورد بررسي، 8 نمونه (33/13%) آلوده به كلستريديوم ديفيسايل بودند. بر اساس نتايج، اختلاف معني داري در شيوع باكتري در مناطق مختلف مشاهده نشد (296/0P =). از بين هشت آنتي بيوتيك مورد استفاده، ناليديكسيك اسيد با 8 جدايه(100%) و كليندامايسين با 7 جدايه(5/87%) به ترتيب بيشترين ميزان مقاومت را داشته اند. هيچ جدايه ي مقاومي به مترونيدازول و وانكومايسين يافت نشد. نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه سالاد سبزيجات آماده به مصرف ممكن است راه انتقال كلستريديوم ديفيسايل به انسان باشد. بنابراين لازم است تدابير لازم براي مقابله با انتقال آلودگي از طريق سالاد سبزيجات آماده مصرف به كار گرفته شود. واژه هاي كليدي: كلستريديوم ديفيسايل، مقاومت آنتي بيوتيكي، سالاد سبزيجات آماده به مصرف، Real-time PCR

ABSTRACT Backgrounds and Aim: Clostridium difficile has been identified as a pathogen in antibiotic associated diarrhea, pseudo-membranous colitis. The ready-to-eat vegetable salads (REVS) are one of the possible sources for transmission of C. difficile to human. The aim of the present study was isolation and identification of Clostridium difficile in ready-to-eat vegetable salads in the restaurants of Tabriz by Real-time PCR and determination of its antibiotic resistance pattern. Materials and methods: This was a cross-sectional study. A total of 60 ready-to-eat vegetable salads samples were collected randomly from restaurants in different regions of Tabriz from February to June 2015. After preparation and DNA extraction, Clostridium difficile was identified by Real-time PCR method. Disc diffusion method was used to determine antimicrobial resistance of the isolates to eight different antibiotics. Using SPSS 19 software, chi-square was used for data analysis. p ?0.05 was considered significant. Results: Among that 60 samples, 8 (13.33%) were contaminated with Clostridium difficile. There was no difference in Clostridium difficle prevalence in different regions (p= 0.296). Among eight antibiotics used in this study, nalidixic acid with 8 isolates (100%) and Clindamycin with 7 isolates (87.5%) had the highest resistance rate. We found no resistance to metronidazole and vancomycin. Conclusion: The results of this study showed that the ready-to-eat salad vegetables can be a way for transmission of Clostridium difficle to humans. Therefore it is necessary to take necessary measures to prevent transmission of the infection through ready to- eat vegetable salads Keywords: Clostridium difficile, Antibiotic resistance, Ready-to-eat vegetable salads, Real-time PCR. Received: Oct 31, 2016 Accepted: Mar 14, 2017