فعاليت ضدقارچي كلاله زعفران (Crocus sativus L.) عليه گونه‌هاي مختلف Aspergillus و توليد زهرابه در محيط آزمايشگاهي

In vitro antifungal activities of saffron (Crocus sativus L.) stigmas against Aspergillus species and toxin production

با توجه به اهمیت گونه‌های مختلف Aspergillus از نظر فساد مواد غذایی و تولید زهرابه، در این تحقیق اثرات ضدقارچی زعفران (Crocus sativus L.) علیه Aspergillus niger، Aspergillus flavus و Aspergillus parasiticus و تولید زهرابه در شرایط آزمایشگاه بررسی شد. بدین منظور، مقدار 0، 5 و 10 میلی‌گرم زعفران پودر شده به‌ازای هر میلی‌لیتر محیط كشت (YES) Yeast Extract Sucrose اضافه گردید و رشد میسیلیومی قارچ‌ها 0، 5، 10، 15، 20، 25 و 30 روز پس از تلقیح اندازه‌گیری شد. سنجش پیكروكروسین، سافرانال و كروسین زعفران به‌روش رنگ‌سنجی انجام گردید. میزان آفلاتوكسین B1 (AFB1) نیز در روز سی‌ام به روش كروماتوگرافی لایه نازك اندازه‌گیری گردید. مقادیر كروسین، پیكروكروسین و سافرانال در عصاره‌های تهیه شده از زعفران مورد بررسی به‌ترتیب 0.25±231.20، 0.85±87.16 و 0.25±34.86 میلی‌گرم/ گرم وزن خشك محاسبه شد. به‌طوری كه با اضافه شدن زعفران به‌میزان 10 میلی‌گرم/میلی‌لیتر به محیط كشت YES، رشد میسیلیومی گونه‌های مختلف Aspergillus نسبت به شاهد (فاقد زعفران) 29 تا 32 درصد كاهش می‌یافت. همچنین با اضافه كردن زعفران به محیط كشت YES، تولید زهرابه AFB1 از 5 میكروگرم/ میلی‌لیتر به سطح غیرقابل ردیابی كاهش داشت. تأثیر زعفران بر كاهش رشد میسیلیومی و كاهش تولید AFB1 بین گونه‌های مختلف Aspergillus فاقد اختلاف معنی‌دار بود. این نتایج استفاده از زعفران را در صنایع داروسازی و به‌عنوان افزودنی‌های مواد غذایی برای جلوگیری از رشد گونه‌های Aspergillus و تولید زهرابه پیشنهاد می‌كند.

This study was carried out to evaluate the in vitro use of Croccus sativus L. (saffron) stigmas in the control of Aspergillus species which is a notable causative agent of food rot and mycotoxins. Antifungal activities of saffron stigmas and toxin production were tested against Aspergillus niger, Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus in vitro. Saffron dried stigmas (0, 5, 10 mg ml-1) were added in Yeast Extract Sucrose (YES) medium and dry weight of the mycelium was measured after 0, 5, 10, 15, 20, 25 and 30 days after inoculation. Colorimetric procedure was used for safranal content in tested saffron and thin layer chromatography for aflatoxin B1 (AFB1) determination. Results indicated that the amounts of crocin, picrocrocin and safranal in saffron sample were 231±0.52, 87.16±0.85 and 34.86±0.25 mg. g-1 dw, respectively. When saffron was added at concentration of 10 mg·ml-1 to YES inoculated with Aspergillus species, mycelium growth decreased by 29-32% compared to control cultures without saffron addition. Conclusively when saffron was added to YES inoculated, AFB1 production decreased from 5µg·ml-1 to not detectable level compared to control cultures without saffron addition. The growth and AFB1 reduction were not significantly different betweenAspergillus species. The results suggest that saffron can be used in pharmaceutical and food formulations to inhibit Aspergillus species and toxin production.