بررسي مولكولي ژنهاي تشكيل دهنده بيوفيلم استافيلوكوكوس اورئوس جداشده از شير خام با روش واكنش زنجيره اي پليمر از چندگانه

Gene molecular study of biofilm of Staphylococcus aureus isolated from fresh milk using multiplex polymerase chain reaction

سابقه و هدف: استافيلوكوكوس اورئوس يكي از مهم­ترين عوامل مسموميت غذايي در جهان مي ­باشد. اين باكتري پاتوژن توانايي ايجاد بيوفيلم را دارا بوده كه مي ­تواند منجر به ايجاد آلودگي­هاي غذايي گردد. حضور ژن ­هاي بيوفيلم در باكتري بسيار حائز اهميت است. هدف از اين مطالعه شناسايي وجود ژن­ هاي چسبنده در باكتري است كه نقش بسيار مهمي در ويرولانس و قدرت بيماري­ زايي آن داشته و حتي از نفوذ آنتي­ بيوتيك ­ها در زمان بيماري­ زايي جلوگيري به­ عمل مي ­آورد. مواد و روش­ ها: تعداد 100 نمونه­ شير تازه از دام زنده جمع­ آوري شد و به ­­منظور شناسايي ژن­ هاي چسبنده (eno, cna, ebp, bbp) در ساخت بيوفيلم استافيلوكوكوس اورئوس، تعداد 60 جدايه از آن ها با روش PCR چندگانه مورد بررسي قرار گرفت. علاوه­ براين، فراواني استافيلوكوكوس­ هاي مقاوم و حساس به آنتي ­بيوتيك ­هاي متي­ سيلين، ونكومايسين و كليندامايسين در بين نمونه­ هاي مورد مطالعه نيز تعيين گرديد. نتايج: از مجموع 60 جدايه از شير تازه، 43/4 درصد كلوني­ ها داراي ژن كدكننده پروتئين متصل شونده به لامينين يا همان ژن eno بودند. به­ علاوه، 90 درصد نمونه ­ها حساس به ونكومايسين، 50 درصد حساس به كليندامايسين و 43/4 درصد حساس به متي­ سيلين بودند. هم چنين، توزيع ساير ژن­ هاي چسبنده (ebp, cna, bbp) به ­ترتيب 11/6، 20 و 25 درصد بود. نتايج بررسي مولكولي حاكي از آن بود كه بيشترين درصد ژن موجود، eno بوده و كمترين درصد مربوط به bbp مي­ باشد. نتيجه­ گيري: در مجموع مي­ توان گفت در مطالعه حاضر بيشترين ميزان حساسيت نمونه­ ها (90 درصد) به ونكومايسين بوده و كمترين مقدار حساسيت (43/3 درصد) مربوط به متي­سيلين مي­ باشد.

Background: Staphylococcus aureus is one of the main causes of food poisoning in the world. This pathogen has the ability to create biofilms that can lead to food contamination. The presence of biofilm genes in bacteria is very important. The aim of this study was to identify sticky genes (eno, cna, ebp, bbp) that play an important role in virulence and pathogenicity of the bacteria and even prevent the penetration of antibiotics in pathogenicity time. Materials and Methods: A total of 100 samples of fresh milk were collected from live animals and 60 isolates were selected to identify sticky genes (eno, cna, ebp, bbp) in the production of biofilm of S. aureus using the multiplex polymerase chain reaction method. In addition, the frequency rates of S. aureus strains resistant and susceptible to antibiotics such as methicillin, vancomycin, and clindamycin were determined among the samples. Results: From a total of 60 isolates of fresh milk, 43.4% of the colonies had laminin-binding protein gene or eno gene. Also, 90% of the isolates were sensitive to vancomycin, 50% sensitive to clindamycin and 43.4% sensitive to methicillin. Distribution rates of other sticky genes including ebp, cna, bbp were 11.6%, 20% and 25%, respectively. Molecular study results showed that the highest and lowest percentages of genes were related to the eno and bbp genes, respectively. Conclusion: The present study shows that the maximum sensitivity of the samples (90%) was related to vancomycin and the least amount of sensitivity (43.3%) was related to methicillin.