مقايسه اثر زهر زنبور عسل و آسپيرين بر ميزان فروكته شدن هموگلوبين انساني

Comparison the effect of Bee venom and Aspirin on the fructation of human hemoglobin

اهداف: فروكته‌شدن باعث ايجاد تغييرات ساختاري در پروتئين‌ها مي‌شود كه در نهايت عملكرد پروتئين‌ها را تغيير داده يا از بين مي‌برد. هدف از انجام اين پژوهش، بررسي اثر ضدفروكته‌كنندگي زهر زنبور عسل و مقايسه آن با آسپيرين بود. روشها: هموگلوبين از افراد سالم و غيرسيگاري استخراج و با استفاده از طيف‌سنج مرئي- ماوراي بنفش تعيين غلظت شد. از آلبومين سرم گاوي به عنوان پروتئين استاندارد، استفاده شد. به‌منظور ارزيابي اثر زهر زنبور عسل و آسپيرين، هموگلوبين در حضور اين دو ماده نيز فروكته شد. به‌منظور مطالعه ميزان آزاد‌سازي گروه هِم از پروتئين و تغييرات باند سورت هموگلوبين از روش طيف‌سنجي مرئي- ماوراي بنفش استفاده شد. ميزان آمين‌هاي آزاد موجود در هموگلوبين طي فروكته‌شدن در حضور آسپيرين و زهر زنبور عسل با استفاده از روش تغييرات در نشر فلوئورسانس فلورسكامين اندازه‌گيري شد. براي بررسي تغييرات ساختاري پروتئين هموگلوبين فروكته‌شده از اسپكتروپلاريمتر و روش طيف‌سنجي دورنگ‌نمايي حلقوي استفاده شد. داده‌ها با استفاده از نرم‌افزار InStat 3 و آزمون‌هاي آماري آناليز واريانس يك‌طرفه تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها: انكوبه‌كردن هموگلوبين در حضور فروكتوز باعث كاهش ميزان جذب باند سورت هموگلوبين فروكته نسبت به هموگلوبين كنترل شد. ميزان آمين آزاد در حضور زهر زنبور عسل در غلظت‌هاي 20 و 40ميكروگرم‌در‌ميلي‌ليتر تفاوت معني‌داري با ميزان آمين آزاد در حضور آسپيرين نداشت. زهر زنبور عسل در روندي وابسته به غلظت مانع از تغيير در ساختار دوم هموگلوبين طي فروكته‌شدن شد. نتيجه‌گيري: زهر زنبور اثر تقريباً مشابهي با آسپيرين در مهار فرآيند فروكته‌شدن هموگلوبين دارد.

Aims: Fructation causes structural changes in the proteins which finally changes or destroys the protein's function. The aim of this study was to investigate the anti-fructation effect of honey bee venom and compare it with aspirin. Methods: Hemoglobin extracted from healthy and nonsmoker subjects and its concentration was determined using optical- UV spectrometry. The bovine serum albumin (BSA) was used as the standard protein. In order to evaluate the effect of honey bee venom and aspirin, hemoglobin in the presence of these two substances was also fructuated. The release of heme group from protein and the changes in hemoglobin soret band was done by optical-UV spectrometry. The amount of free amines available in hemoglobin during fructation in the presence of aspirin and honey bee venom was measured by changes in the fluorescence florscasmine emission method. To investigate the structural changes of fructated hemoglobin protein spectropolaimetry and circular bicolor spectrophotometery method were used. Data were analyzed using InStat 3 software and One-way ANOVA test. Results: Hemoglobin incubation in the presence of fructose decreased the absorption of soret band of fructated hemoglobin compared to control. The amount of free amine in the presence of honey bee venom in of 20 and 40μg/ml had no significant difference with free amine in the presence of aspirin. Honey bee venom inhibited the change in second structure of hemoglobin dose-dependently during fructation. Conclusion: Honey bee venom has relatively similar effect with aspirin to inhibit hemoglobin fructation process.