بررسي اثرات نيترات كادميوم و تنظيم كننده هاي رشد در كشت بافت گياه لوبيا چيتي.Phaseolus vulgaris L

The effects of Cadmium nitrate and growth regulators in Phaseolus vulgaris L. tissue culture

كادميوم فلز سنگيني كه مقادير سمي آن به طور طبيعي در خاك ها وجود دارد و يا بوسيله فعاليت هاي صنعتي،معدن كاوي وكودهاي كشاورزي واردخاك شود.گياه لوبيايكي ازگياهاني كه توان تحمل سميّت كادميوم ر ادارد.گياه لوبيا از مهمترين اعضاي تيره باقلائيان(Fabaceae) كه اهميت اقتصادي بالايي در تغذيه انسان دارد.يكي از روش هاي مناسب براي حفظ وازدياد گياهان،باززايي از طريق كشت بافت محسوب مي شود.در پژوهش حاضر، بررسي اثرات نيترات كادميوم و تنظيم كننده هاي رشد در كشت بافت گياه لوبيا چيتي ، درصد جوانه زني،ريشه زايي وكالوس زايي بذرهاي گياه لوبيا چيتي رقم (Cos16) در محيط هاي داراي نيترات كادميوم وهورمون 2ip درمحيط MS مورد سنجش قرارگرفتند.درابتدا بذرها به ترتيب : با اتانول 70درصد ،آب مقطرو هيپوكلريت سديم 5درصد به صورت سطحي سترون شدند. بذرهاي سترون به منظور بررسي درصد جوانه زني درمحيط هاي كشت متفاوت شامل محيط T3(MS+CdNO3:0.05mg⁄l) , T2(MS+ CdNO3:0.05mg⁄l+2ip:0.1mg⁄l);T1(MS+2ip:0.1mg⁄l); T0(MS) كشت شدند.از دانه رست هاي 10روزه ي سترون به دست آمده از كشت بذرها در محيط T0،جداكشت هاي برگ و محور زير لپه تهيه شدند ودرمحيط هاي T2(MS+2ip:5mg⁄l),T1(MS+2ip:3mg⁄l),T0(MS)قرارگرفتند.تعدادي از جداكشت هاي محورزيرلپه به محيط هاي (T3(MS+NAA:0.5mg⁄l+BAP:2.5mg⁄l),T2(MS+BAP:2.5mg⁄l),T1(MS+NAA:0.5mg⁄l انتقال يافتند. درنهايت كالوس هاي جداكشت محورزيرلپه از محيط T0در محيط هاي (T2(MS+CdNo3:0.1mg⁄l),T1(MS+CdNo3:0.05mg⁄l),T0(MS كشت شدند. طبق نتايج ، بيشترين وكمترين درصد جوانه زني به ترتيب درمحيط (T0(MS و (T3(MS+CdNo3:0.05mg⁄l، بهترين درصد كالوس دهي درمحيط (T0(MSدر جداكشت محور زير لپه مشاهده شد . بيشترين ريشه زايي در جداكشت برگ در محيط (T2(MS+2ip:5mg⁄l وبهترين كالوس زايي و ريشه زايي در جدا كشت محورزيرلپه در محيط (T3(MS+NAA:0.5mg⁄l+BAP:2.5mg⁄l صورت گرفت. سرانجام در كشت كالوس هاي محورزير لپه، بهترين كالوس و بيشترين ريشه زايي در محيط فاقد نيترات كادميوم:(T0(MSحاصل شد.

Cadmium is a heavy metal that it’s poisonous forms can naturally exist in soil or can enter to soil in following ways:by industrial activities,mine probing and agricultural fertilizers.Phaseolus vulgaris L.is one of the plants that can tolerate poison of cadmium and Bean is one of the most important species in Fabaceae family that have high economic significance in human nutrition.Regeneration by tissue culture is one of the effective and appropriate methods for preserving and also propagation of plants.In this study,research of effects cadmium nitrate and growth regulators in Phaseolus vulgaris L.tissue culture,percentage of germination,rhizogenesis and callus generation of seed of Bean plant cultivar(cos 16)in mediums containing cadmium nitrate and2ip hormone evaluated.In the Beginning seeds were surface sterilized respectively with:etanol70%,distilled water and sodium hypocholorite5%.Sterilized seeds were cultured into different culture containing:T0(MS),T1(MS+ 2ip: 0.1 mg⁄l );T2(MS + 2ip: 0.1mg⁄l +CdNo3:0.05mg⁄l);T3( MS+ CdNo3: 0.05mg⁄l)for percentage of germination.Explants of leaf and hypocotyl were prepared from ten-day sterilized seedling cultured in T0 medium and moved in T0(MS),T1(MS+2ip: 3mg⁄l );T2(MS+2ip: 5mg⁄l).A number of hypocotyl explants were transferred intoT1(MS+ NAA: 0.5mg⁄l),T2 (MS+ BAP:2.5mg⁄l) ;T3(MS+NAA:0.5mg⁄l+BAP:2.5mg⁄l). Eventually calluses of hypocotyl explant subcultured fromT0 medium into T0(MS), T1(MS+CdNo3:0.05mg⁄l);T2(MS+CdNo3: 0.1mg⁄l).According to the above results,maximum and minimum percentage of germination in T0(MS),T3(MS+CdNo3: 0.05mg⁄l).Best percentage of callus generation inT0(MS),was observed in hypocotyl explants.Also most rhizogenesis inT2(MS+2ip:5 mg⁄l)in leaf explant and Best callus generation and rhizogenesis were seen inT3(MS+NAA: 0.5 mg⁄l +BAP:2.5mg⁄l)in hypocotyl explant.Finally In subculture of the callus of hypocotyl explant,the most callus generation and rhizogenesis was observed in absence of cadmium nitrate:T0(MS).