بررسي اثر حفاظتي عصاره ي آبي گياه چاي ترش بر جلوگيري از تجمع پروتئين آلفا- لاكتالبومين

Investigation the protective ability of H. sabdariffa aqueous extract on the aggregatin of α-lactalbmin

تجمعات پروتئيني از عوامل مختلفي ناشي شده و منجر به بيماري هاي گوناگون در انسان ها و ساير موجودات زنده مي گردد. يافتن راهكاري مناسب جهت جلوگيري از ايجاد اينگونه تجمعات مي تواند بسيار حائز اهميت باشد. گياه چاي ترش منبع غني از آنتي اكسيدان هاي طبيعي است كه مي تواند از بدن در برابر آسيب هاي ناشي از راديكال هاي آزاد محافظت كند. در اين پژوهش اثر عصاره ي آبي گياه چاي ترش بر روي پروتئين آلفا-لاكتآلبومين درحضور دي تيو تريتول(DTT) به عنوان عامل القا كننده ي تجمع مورد بررسي قرار گرفت. خاصيت چاپروني عصاره بر روي تجمع پروتئين توسط روش هاي طيف سنجي نور مرئي، فلورسانس تيوفلاوين تي(ThT)، اسپكتروسكوپي فلورسانس ذاتي، 1-آنيليلينو8-نفتالن سولفونات (ANS) و دورنگ نمايي دوراني (Circular dichroism) بررسي شد. نتايج بدست آمده از طيف سنجي نور مرئي و اتصال تيوفلاوين تي نشان داد كه عصاره ي چاي ترش از ايجاد تجمع و تشكيل آميلوئيد در پروتئين جلوگيري كرده و اين تاثير با افزايش غلظت عصاره شدت مي يابد. طبق نتايج بدست آمده از آزمايشات فلورسانس، عصاره با نواحي هيدروفوب در معرض قرار گرفته در پروتئين احيا شده برهمكنش كرده و از تجمع جلوگيري مي كند. نتايج حاصل از دورنگ نمايي حلقوي نشان داد كه دي تيو تريتول تغييراتي در ساختمان دوم پروتئين ايجاد مي كند كه در حضور عصاره تغييرات كمتري مشاهده مي شود. نتايج اين پژوهش چاي را به عنوان عاملي بالقوه جهت جلوگيري از تجمع پروتئين هاي مختلف دخيل در بيماري هاي گوناگون ناشي از تجمع پيشنهاد مي كند.

protein aggregates generated by different reason, cause many diseases in humans and other organisms. Finding proper ways to stabilize or prevent of protein aggregation could be important. H. sabdariffa is a good source of natural antioxidants which may protect the body from damage effeccted by free radicals. This study examined the effect of aqueous extract of H. sabdariffa on the aggregation of reduced α-lactalbumin. The chaperone properties of H. sabdariffa extract on protein aggregation were determined by measuring light scattering absorption, thioflavin T binding assay, fluorescence, and circular dichroism (CD) spectroscopy. Visible absorption spectroscopy and ThT fluorescence results shows that H. sabdariffa extract prevent protein aggregation and amyloid formation in a concentration-dependent manner. According to the results of Fluorescence Spectroscopy, H. sabdariffa extract interact with hydrophobic area of protein and inhibit aggregation. CD spectroscopy results shows that DTT caused changes in secondary structure of protein and in the presence of extract, fewer changes observed. Our finding suggests the possibility of using H. sabdariffa extract as a potential agent for inhibition of protein aggregation in various disease.