ارزيابي بيماري زايي و پلي مورفيسم ژن omph پاستورلا مولتاسيدا

Evaluation of pathogenicity and polymorphism of ompH gene in Pasteurella multocida

سابقه و هدف: پاستورلا مولتاسيدا باكتري گرم منفي است كه باعث بيماري هاي تنفسي در حيوانات اهلي و وحشي مي شود. اين مطالعه با هدف جداسازي و شناسايي باكتري پاستورلا مولتاسيدا و نيز بررسي پلي مورفيسم ژن ompH در اين باكتري انجام شد. مواد و روش ها: در اين مطالعه مقطعي تعداد 160 نمونه سوآب بيني و حلق از بزهاي مبتلا به پاستورلوز در استان فارس جمع آوري گرديد. طبقه بندي مولكولي و پلي مورفيسم 26 جدايه با روش RFLP-PCR و به كمك آنزيم هاي برش دهنده HindIII و EcoRI انجام گرفت. هر نمونه با غلظت نيم مك فارلند به دو سر موش تزريق شد. پس از برش ژن ompH توسط آنزيم هاي اندونوكلئاز، در نهايت الگوهاي ايجاد شده با مدت زمان مرگ موش ها مقايسه گرديد. يافته ها: آنزيم هاي HindIII و EcoRI هر كدام الگوهاي متفاوتي ايجاد كردند كه در مقايسه با ميانگين زمان مرگ موش ها قابل توجه بود. تمامي جدايه هاي كشنده ميانگين زمان مرگ زير 24 ساعت داشتند. همچنين از مجموع 29 پاستورلا مولتاسيدا جدا شده، 89.6 درصد قادر به مرگ موش ها بودند. نتيجه گيري: با توجه به الگوهاي ايجاد شده، مدت زمان مرگ در موش ها نيز متفاوت بود. بر اين اساس نمونه هاي داراي الگوهاي پر تكرار موش ها را در زمان كوتاهتري از بين بردند و كشنده تر بودند. الگوهاي ناشي از هضم آنزيمي به منظور شناسايي سويه هاي حاد و بيماري زا و در نتيجه تهيه سويه هاي واكسينال به كار مي رود. بنابراين با توجه به تنوع پذيري اين سويه ها تهيه واكسن هاي چندگانه ضرورت پيدا مي كند.

Background & Objectives: Pasteurella multocida is a Gram-negative facultative bacterium, causing respiratory diseases in various domestic and wild animals. The aim of this study was isolation and identification of P. multocida and investigation of ompH gene polymorphism of in goats P. multocida isolates. Material & Methods: In a cross-sectional study a total of 160 swab samples from nose and throat of goats infected with Pasteurellosis in Fars province were collected. The ompH gene polymorphism in 26 isolates was genotyped by PCR-RFLP technique. Restriction digestion was performed using HindIII and EcoRI endonuclease enzymes. Each sample was injected into two mice at a concentration of 0.5 McFarland's standard. After ompH gene digestion by endonuclease enzymes, RFLP patterns were compared with mice mean dead time (MDT). Results: Each HindIII and EcoRI enzymes made different patterns, which were remarkable in comparison with MDT in mice. All lethal isolates had MDT less than 24 hours. Out of 29 P. multocida isolates, 89.6 % were lethal in mice. Conclusion: According to established patterns, MDT in mice was different. Based on the results, the samples with more frequent patterns killed mice in a shorter time and were more lethal. Enzyme digestion patterns can be used to detect virulent and pathogenic strains and to provide vaccine strains. Considering the variability of these strains, the production of multiple vaccines is necessary.