تكثير دايره غلتان روشي جهت شناسائي پرندگان (مطالعه موردي: كبك Alectoris chukar)

Rolling Circle Amplification as a method for identification of birds (Case study: Alectoris chukar)

ماكيان سانان در فهرست مورد تهديدترين پرندگان محسوب مي شوند كه شكار و بهره برداري از آنها به منظور اهداف متفاوتي از جمله: غذا، تفريح و يا اهداف تجاري صورت مي گيرد. شكار و بهره برداري بيش از حد سبب شده است كه درصد بالايي از گونه هاي ماكيان سانان (26/4%) آنها به عنوان مورد تهديد با خطر انقراض در فهرست سرخ IUCN قرار بگيرند. از اينرو به منظور اقدامات موثر حفاظتي و همچنين جلوگيري از شكار بي رويه ماكيان سانان و اطمينان از بقاي آنها به معرفي روش تكثير دايره غلتان (Rolling Circle Amplification) به عنوان روشي مطمئن و سريع جهت شناسايي پرنده شكار شده توسط شكارچيان متخلف مي پردازيم. در اين روش كاوشگرهاي اختصاصي براساس تفاوت تنها در يك نوكلئوتيد از ناحيه ي ژن مورد نظر براي گونه ي هدف طراحي مي شوند كه در اين مطالعه طراحي كاوشگر بطور موردي براي گونه ي كبك (Alectoris chukar) صورت پذيرفت. كاوشگر هاي اختصاصي پس از هيبريداسيون با DNA به شكل يك مولكول بسته درآمده و با اتصال به هدف و تكثير در شرايط تك دمايي مورد ارزيابي قرار مي گيرند. محصول تكثير يافته به راحتي روي ژل آگارز يا پس از اضافه نمودن رنگ هاي فلورسنت به طور مستقيم زير نور UV قابل مشاهده است. بدين ترتيب، با توجه به آسان بودن عمليات آزمايش RCA و عدم نياز به تجهيزات آزمايشگاهي خاص، اين روش ابزار قدرتمندي را جهت شناسايي پرندگان مورد شكار از جمله: كبك، قرقاول و حل مسائل مديريتي و حفاظتي آنها فراهم مي نمايد.

The Galliformes are one of the most threatened groups of birds which hunting and other forms of exploitation are applying for different purposes such as: food preparation, entertainment or other commercial purposes. Hunting and over exploitations have been leading that the high percentage of Galliformes species (26.4%) are placed as threatened with extinction in the IUCN Red List. Therefore, in order to take effective conservation actions and preventing of over hunting of Galliformes and also to ensure their survival we introduce the RCA as a certain and quick method to identify the gamebirds by offending hunters. In this method, specific probes are designed for Alectoris chukar based on differences in nucleotide regions of the cytochrome c oxidase subunit I gene. Specific probes created a closed molecule after hybridization with DNA and were evaluated by attaching to the target and amplification in isothermal condition. The amplification product could be easily visualized on agarose gel electrophoresis or by adding fluorescence staining in UV. In conclusion, regarding the simplicity of RCA reaction and no need to special laboratory instruments, this method provides a strong tool for identification of gamebirds (Chukar and Pheasant) and resolve their management and conservation problems.