مقايسه اثر آنتي اكسيداي و سيتوتوكسيك عصاره هاي آبي و هيدروالكلي گياه سداب (Ruta graveolens)بر رده سلولي سرطان پروستات(DU145)

Compare Antioxidant and cytotoxic effects of aqueous and hidroalcoholic extracts of Ruta graveolens on DU145 cell line

سرطان پروستات دومين سرطان شايع در مردان پس از سرطان پوست محسوب مي گردد. صرف هزينه هاي زياد براي پرتو درماني، شيمي درماني و جراحي بافت مهاجم مشكلات و عوارض جانبي زيادي را براي بيماران به وجود مي آورد، لذا جايگزين كردن روش ها و تركيبات جديد با اثرات جانبي كمتر، مي تواند حائز اهميت باشد. تركيبات گياهي و طبيعي به دليل مزاياي مختلف مورد توجه قرار گرفته اند. تاكنون گياهان دارويي متعددي شناسايي شده اند كه داراي ويژگي هاي ضد سرطاني مي باشند و همچنين گياهان به عنوان منابع مهم تركيبات آنتي اكسيدان و قتل محسوب مي شوند. يكي از گياهان دارويي كه در طب سنتي ايران و ملل مختلف سايقه مصرف ديرينه داشته و خواص درماني چشمگيري را براي آن ذكر كرده اند، گياه سداب با نام علمي Ruta graveolens است. ارزش درماني اين گياه به قدري زياد بوده كه از آن به عنوان درمان كننده جميع بيماري ها نام برده شده است و تا كنون بيش از 85 ماده در سمت هاي مختلف (برگ، ساقه، ريشه و دانه اين گياه با استفاده از كروماتوگرافي گازي شناسايي شده است. در اين مطالعه به بررسي اثر سيتوتوكسيك عصاره آبي و هيدروالكلي گياه سداب و مقايسه اثر اين دو عصاره با هم بر روي رده سلولي 145-DU پرداخته ميزان تاثير آن در سلول هاي سرطاني پروستات مورد بررسي قرار گرفت. علاوه بر اين عصاره هاي گياه سداب از نظر خاصيت آنتي اكسيداني و ميزان تركيبات فنلي مورد ارزيابي قرار گرفتند. گياه سداب از طريق مركز تحقيقات كشاورزي و منابع طبيعي استان اصفهان تهيه گرديد. سپس عصاره هاي آبي، هيدرو الكلى و متانولي از اين گياه تهيه شد. رده سلولي 145-DU در محيط كشت 1640-RPMI حاوي 10. سرم گاوي در انكوباتور با 5% CO2 كشت داده شد و تحت غلظت هاي مختلف عصاره هاي آبي و هيدروالكلي طي 24، 48 و 72 ساعت انكويه شد. از روش MTT براي محاسبه در صد بقاء سلول ها در حضور و فقدان عصاره ها استفاده شد و جذب نوري توسط دستگاه الايزا با طول موج 540 نانومتر اندازه گيري شد. ميزان فعاليت آنتي اكسيداني اين عصاره ها توسط ارزيابي ميزان آنتي اكسيداني يك محلول با روش DPPH اندازه گيري شد. همچنين عصاره هاي اين گياه براي اندازه گيري ميزان فنل تام با استفاده از معرف فولين سيو كالتر مورد آناليز قرار گرفت. از گاليك اسيد به عنوان تركيب استاندارد استفاده گرديد و فنل تام بر حسب ميلي گرم بر گرم گاليك اسيد محاسبه شد. خاصيت سيتوتوكسيك عصاره هاي آبي و الكلي گياه سداب بر رده 145- DU ضعيف بوده ولي خاصيت آنتي اكسيداني و ميزان قتل آن قابل توجه مي باشد.

The prostate cancer is considered as the second most common malignancy in men after skin cancer. The alternative methods and novel compounds with lower side effects can be very important and critical for the patients due to high costs and many complications of radiotherapy, chemotherapy and invasive tissue surgery. The natural and herbal compounds have been noticed since they have variable advantages. The several herbal drugs have been identified up to now which have anticancer effect. Indeed, the plants are considered as an important source of antioxidant and phenolic compounds. The Sodab plant, Ruta graveolens, as a member of herbal drugs has a long consumption history in traditional medicine of Iran and different nations besides its significant therapeutic effects. The Sodab is a very valuable plant which has been named as “a treatment for all diseases” and over 85 compounds of its different parts (leaves, stems, roots and seeds) has been recognized by gas-chromatography. The goals of this study were to investigate the cytotoxic effect of aqueous and hydroalcoholic extracts of Sodab besides the comparison of these two extract effects on DU-145 cell line. In addition, the effect of this plant was studied on the prostate cancer cells. Furthermore, the antioxidant effect and the amount of phenolic compounds of Sodab extracts were evaluated. The Sodab plant was prepared from the Agriculture and Natural Resources Research Center of Isfahan. The next step was preparation of the water, hydroalcoholic and methanol extracts of this plant. The DU-145 cell line cultivation conditions were RPMI-1640 culture medium which contains 10% bovine serum, incubation with 5% CO2 and different concentrations of aqueous and hydroalcoholic extracts during 24, 48 and 72 hours of incubation. The MTT method was used in order to estimate the cells viability percent in the presence and absence of the extract and in the optical absorption was read with wavelength 540 nm by the ELISA device. The selected method for estimation of the antioxidant activity was DPPH. In addition, the total phenolic content of this plant extracts was analyzed by Folin Ciocalteu reagent. The gallic acid was used as the standard compound and the total phenol was measured based on the milligram per gram of gallic acid. The cytotoxic effect of Sodab aqueous and hydroalcoholic extracts was weak on DU-145 cell line while the antioxidant activity and the phenolic content of this plant were significant.