اثر اسانس آويشن شيرازي بر توليد يون سوپراكسيد و نيتريك اكسيد و بيان ژن‌هاي NADH اكسيداز و نيتريك اكسيد سنتاز در سلول‌هاي ماكروفاژ

هدف: اثرات مهاركننده‌ي اسانس آويشن شيرازي بر توليد سوپراكسيد و نيتريك اكسيد و بيان ژن‌هاي NADH اكسيداز (NOX) و نيتريك اكسيد سنتاز (NOS) مورد بررسي قرار گرفت. مواد و روش‌ها: اسانس گياه توسط روش تقطير جداسازي و اجزاي تشكيل‌دهنده آن بوسيله كروماتوگرافي گازي متصل به طيف‌سنج جرمي مشخص شد. قدرت جاروب كنندگي اسانس بر روي راديكال سوپراكسيد و نيتريك اكسيد به روش بيوشيميايي مورد بررسي قرار گرفت. در مرحله بعد سلول‌هاي ماكروفاژ موشي تحريك‌شده با ليپوپلي ساكاريد (LPS) با غلظت هاي مختلف اسانس تيمار شدند و بيان ژن‌هاي ان آ دي اچ اكسيداز و نيتريك اكسيد سنتاز به روش Real Time PCR و همچنين ميزان توليد يون سوپراكسيد و نيتريك اكسيد به روش‌هاي بيوشيميايي مورد بررسي قرار گرفت. نتايج: تركيبات اصلي تشكيل‌دهنده اسانس گياه آويشن، لينالوول (32/9 درصد)، كارواكرول (26/7 درصد)، تيمول (12/5 درصد)، پاراسيمن (4/5 درصد) و الفا- پينن (2 درصد) مي‌باشند. اسانس آويشن در غلظت هاي پايين 70-100 ميكروگرم/ميلي‌ليتر قدرت جاروب كنندگي زيادي از آنيون‌هاي سوپراكسيد (O2-) و نيتريك اكسيد (NO) در مطالعات درون شيشه‌اي از خود نشان مي‌دهد. اسانس در غلظت غيرسيتوتوكسيك، در ماكروفاژهاي موشي تحريك‌شده توسط LPS باعث كاهش شديد توليد يون سوپراكسيد و نيتريك اكسيد شد. همچنين در سلولهاي J774 (لاين ماكروفاژهاي موشي) تحريك‌شده با LPS اسانس آويشن باعث كاهش بيان ام آر ان آ نيتريك اكسيد سنتتاز و NADH اكسيداز شد. نتيجه‌گيري: مشاهدات حاكي از آن است كه فعاليت آنتي‌اكسيداني اسانس آويشن احتمالا از طريق كاهش توليد نيتريك اكسيد، سوپراكسيد و كاهش بيان ژن‌هاي نيتريك اكسيد سنتتاز و NADH اكسيداز است.

Objective: In this study, inhibitory effect of Zataria multiflora essential oil on superoxide and nitric oxide production and NADH oxidase (NOX) and nitric oxide synthase (NOS) expression was examined. Materials and Methods: Zataria essential oil was obtained by hydro-distillation and chemical composition was analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Superoxide and nitric oxide scavenging effects of zataria essential oil were tested by biochemical assays. Then, LPS-stimulated macrophages were treated by different concentrations of essential oil and expression of superoxide-producing enzyme and nitric oxide-producing enzyme was investigated by Real-time PCR, also superoxide anion and nitric oxide levels was examined by biochemical assays. Results: The main components of the zataria essential oil were linalool (32.9%), carvacrol (26.7%), thymol (12.5%), p-Cymene (4.5%) and ?-Pinene (2%). Zataria essential oil sequestered superoxide anion (O2-) and nitric oxide (NO) in in vitro assay at low concentrations of 70-100 µg/ml. Zataria essential oil at non-cytotoxic level strongly reduced intracellular reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) production in LPS-stimulated macrophages. Superoxide-producing enzyme and NO producing enzyme expression in LPS-stimulated murine macrophage (cell line J774) was declined by zataria essential oil. Conclusion: Due to the results, the in vivo antioxidant activity of zataria essential oil may be attributed to down-production of NO and superoxide and also down-regulation of NOS and NOX expression.