بررسي ميزان بقاء و رشد سلول هاي بنيادي CD93 بر روي داربست سه بعدي زيست تخريب پلي كاپرولاكتون- ژلاتين

Assessment of CD93 Stem Cell Growth and Survival on Three- Dimensional Biodegradable PCL-Gelatin Scaffold

سابقه و هدف: استفاده از داربست هاي سه بعدي با قابليت شبيه سازي محيط سه بعدي داخل بدن، چشم انداز جديدي در تمايز هدفدار و استفاده درماني از سلول هاي بنيادي گشوده است. در اين مطالعه ما به بررسي ميزان سازگاري و بقاء سلول هاي بنيادي CD93 با داربست زيست تخريب پلي كاپرولاكتون- ژلاتين پرداختيم. مواد و روش ها: در اين مطالعه تجربي، داربست سه بعدي پلي كاپرولاكتون ژلاتين با استفاده از روش الكتروريسي سنتز شد و ساختار مولكولي داربست توسط ميكروسكوپ الكتروني ((SEM) بررسي شد. سطح داربست توسط اشعه UV استريل سازي شد و سلول هاي بنيادي خونساز CD93 كه قبلاً جداسازي شده بودند، به دو گروه كشت در محيط معمولي (plate) و كشت بر روي داربست (Scaffold+Cell) تقسيم شدند. بقاء و رشد سلول ها از طريق assay MTT و ميكروسكوپ الكتروني در روزهاي 7، 14 و 28 بعد از كشت بررسي شد. يافته ها: بررسي ميكروسكوپ الكتروني در روز هفتم نشانگر چسبندگي مناسب سلول هاي CD93 به فيبرهاي داربست و ترشح ماتريكس خارج سلولي بود. در بررسي ميزان بقاء سلول ها در روزهاي 7، 14 و 28 پس از كشت، تفاوت معني داري بين دو گروه وجود نداشت، ولي در گروه Scaffold+Cell در روزهاي 7 و 14 و 28 تفاوت معني داري مشاهده شد (0/05< p). استنتاج: نتايج اين مطالعه نشان مي دهد داربست سلولي نانوفيبر PCL داراي سازگاري بالائي با سلول هاي بنيادي CD93 است و مجاورت با اين داربست باعث افزايش بقاء و رشد سلول ها مي شود. استفاده از اين داربست مي تواند در افزايش كارائي درمان در مطالعات بعدي در زمينه درمان آسيب هاي بافتي و زخم ها توسط سلول هاي بنياديCD93 موثر باشد.

Background and purpose: Application of three-dimensional scaffolds with the ability to simulate a three-dimensional in vivo environment has opened new perspective on targeted differentiation and therapeutic use of stem cells. In this study we examined the compatibility of CD93 stem cells with biodegradable pcl- gelatin scaffold. Materials and methods: In this experimental study, three-dimensional scaffolds made of PCL - gelatin using electrospining synthesis and its molecular structure was tested by SEM electron microscopy. The scaffold surface was disinfected by UV ray. The hematopoietic CD93stem cells of those isolated previously were divided into two groups including normal cultured (plate) and culture on scaffolds (scaffold + cell). The survival and growth of the cells were measured through MTT assay and electron microscopy at 7, 14, and 28 days after culturing. Results: Electron microscopic analysis on the seventh day showed appropriate adhesion of CD93 cells on scaffold fibers and secretion of extracellular matrix. Survival rate of the cells at 7, 14, and 28 days after culturing were not significantly different between the two groups. But at the same days significant differences were observed in the Scaffold + Cell group (P< 0.05). Conclusion: This study suggests that PCL nanofiber scaffolds has high compatibility with CD93 stem cells and proximity to this scaffold lead to increased survival and growth of the cells. Further studies on the treatment of tissue damage and scarring by CD93 stem cells using this scaffold can be effective in increasing treatment efficiency.