بررسي مولكولي فاكتورهاي ويرولانس پاستورلا مولتوسيداهاي جدا شده از گوسفند در ايران

Molecular Study of Virulence Factors of Pasteurella Multocida Isolates from Sheep in Iran

پاستورلا مولتوسيدا يكي از باكتري هاي مهم پاتوژن در بسياري از حيوانات و انسان مي باشد. اين باكتري عامل بيماري هاي مختلفي از جمله: پنوموني در نشخواركنندگان، رينيت آتروفيك درخوك، وباي مرغان و سپتي سمي هموراژيك در گاو مي باشد. عوامل حدت مختلفي در بيماري زايي اين باكتري شناسايي شده اند؛ از جمله آنها، پروتئين غشاي خارجي OmpH، ادهسين ها شامل ژن هاي ptfA،phfA ، tadD، hsf-1 ، fimA و ژن درمونكروتوكسين (toxA ) را مي توان نام برد. هدف از اين مطالعه بررسي حضور اين ژن ها در بين جدايه هاي پاستورلا مولتوسيدا به دست آمده از موارد پنوموني در گوسفند است. سي جدايه پاستورلا مولتوسيدا با روش هاي باكتري شناسي و بيوشيميايي تعيين هويت گرديدند. تمام جدايه ها با روش PM-PCR و استفاده از پرايمر اختصاصي KMT1 مورد تائيد قرار گرفت و با روش CAP-PCRتيپ كپسولي آن ها مشخص گرديد. تايپينگ مولكولي نشان داد كه جدايه هاي گوسفندي مورد مطالعه در ايران به گروه كپسولي A تعلق دارند. همه جدايه ها حاوي ژن هاي OmpH و fimA بودند، اكثر جدايه ها (93/3%) حاوي ژن هاي ptfA ،hsf-1و 90% داراي ژن toxA بودند. كمترين فراواني در ژن هاي tadD و phfA مشاهده شد (36/6%). حضور عوامل حدت، پتانسيل ژنتيكي جدايه هاي مذكور را براي ايجاد بيماري پنوموني گوسفندان نشان مي دهد. مطالعه تكميلي به منظور مشخص شدن نقش فنوتيپي هر يك از عوامل حدت در ايجاد بيماري توصيه مي شود. به طوركلي بررسي فاكتورهاي حدت، به انتخاب سويه مناسب، براي تهيه واكسن كارآمد و مفيد كمك مي كند

Pasteurella multocida is responsible for significant infections of a wide range of animal species and human. The organism causes a variety of diseases which include pneumonic pasteurellosis of ruminants, porcine progressive atrophic rhinitis (PAR) in pigs, fowl cholera and bovine haemorrhagic septicaemia (HS). The pathogenicity of P.multocida is associated with various virulence factors include outer membrane and porin proteins like ompH, adhesins (ptfA, fimA, hsf-1, pfhA, tadD) and dermonecrotoxin (toxA). The aim of this study was to identify the presence of these virulence genes among ovine P.multocida isolates. Thirty P.multocida isolates obtained from sheep pneumonia cases were identified by bacteriological and biochemical methods. All the isolates were confirmed as P. multocida by PM-PCR using species specific primers, KMT1. Molecular capsular typing (CAP-PCR) showed that all of the isolates belonged to type A. All of the isolates harboured FimA and OmpH genes. The majority (93.3%) of the isolates contained PtfA , Hsf-1 and (90%) for ToxA. The frequency of TadD and PfhA genes was the lowest (36.6%). Presence of virulence factors of P.multocida isolates showed genetically potential in pathogenesis of ovine pneumonia. Further studies for phenotypic determination of virulence factors with ethology of pneumonia are suggested. Overall, investigations of virulence factors help us to selection of suitable strain for an effective vaccine production.