واكسن پرتوتابي‌شده بيماري ويروسي تب برفكي تايپ آسيا-1 و ارزيابي پاسخ ايمني در خوكچه هندي

FMD virus type Asia-1 irradiated vaccine and evaluation of immune response on guinea-pig model

مقدمه: بيماري تب برفكي يكي از بيماري‌هاي حاد ويروسي است كه موجب بيماري گونه‌هاي مختلف حيوانات زوج‌سم و وحوش مي‌شود. ويروس عامل بيماري به خانواده پيكورناويريده و جنس آفتوويروس تعلق دارد. هدف پژوهش حاضر، ساخت راديوواكسن بيماري تب برفكي تايپ آسيا-1 با استفاده از پرتوي گاما و ارزيابي پاسخ‌هاي ايمني هومورال و سلولي در خوكچه‌هاي هندي واكسينه‌شده است. مواد و روش ها: ابتدا ويروس تب برفكي تايپ آسيا-1 تكثير و در دوزهاي مختلف پرتوي گاما پرتوتابي شد. سپس با منحني دوز/پايندگي، فاكتور ارزشD10 و دوز مطلوب غيرفعال‌سازي ويروس به‌ترتيب 69/7 و50 كيلوگري محاسبه شدند. ويژگي‌هاي آنتي‌ژنيك ويروس پرتوتابي‌شده و شاهد به روش ثبوت كمپلمان مقايسه و بي‌ضرري واكسن با استفاده از چهار پاساژ كور متوالي تأييد شد. در مراحل بعد، ويروس غيرفعال‌شده با ادجوانت هيدروكسيدآلومينيوم فرموله و به‌عنوان راديوواكسن استفاده شد. پاسخ‌هاي ايمني در سه گروه خوكچه هندي واكسينه‌شده با راديوواكسن، واكسن رايج و بافر فسفات (شاهد) بررسي شدند. نتايج: نتايج نشان دادند تيتر آنتي‌بادي خنثي‌كننده در گروه‌هاي راديوواكسن و واكسن رايج نسبت به گروه شاهد افزايش معناداري (P<0.05) داشته و ميزان توليد آنتي‌بادي در دو گروه راديوواكسن و واكسن رايج نسبت به يكديگر اختلاف معناداري نداشته است (P>0.05). بررسي تكثير لنفوسيت‌هاي طحال با آزمون MTT نشان داد كه افزايش تكثير لنفوسيت‌هاي T در گروه‌هاي راديوواكسن و واكسن رايج مشابه و اين افزايش نسبت به گروه شاهد معنادار (P<0.05) است. بحث و نتيجه گيري: راديوواكسن تهيه‌شده در پژوهش حاضر، پاسخ ايمني هومورال و سلولي مناسبي در خوكچه هندي ايجاد كرد و در پژوهش‌هاي آتي براي واكسيناسيون گوساله، ميزبان اصلي اين بيماري، استفاده‌شدني است.

Introduction: Foot and Mouth Disease (FMD) is the most contagious disease in cloven-hoofed animals which causes a lot of economical losses. FMD virus belongs to Picornaviridae family and Aphthovirus genus. The aim of the study is evaluation of humoral and cellular immune responses triggered by a Gamma-irradiated FMD vaccine in the guinea-pig model. Materials and Methods: FMD virus type Asia-1 was multiplied on BHK21 cell line and irradiated by gamma ray in different doses. According to dose/survival curve, D10 value and optimum dose of virus inactivation were calculated 7.69 and 50 kGy, respectively. Antigenic characteristic of irradiated and un-irradiated virus samples were evaluated by complement fixation test (CF test) and safety test was done by four blind passages cell culture on IBRS2 cell line. The inactivated virus sample was formulated as Radio- vaccine and immune responses were evaluated in three groups of ginea-pigs; the first group Radio-vaccine, the second group conventional vaccine and the last one was negative control. Results: The results of neutralizing antibody titration for two vaccinated groups were significant (P<0.05), but between Radio-vaccine and conventional vaccine was no significant. The increase in splenocyte multiplication for two vaccinated groups by MTT test was significant (P<0.05). Discussion and conclusion: The Gamma irradiated inactivated FMD type Asia-1 vaccine is a good candidate for immunization of guinea-pig without the problems such as residue, virus escape and etc. and it can use for vaccination of cattle in the future.