وقوع سويه‌هاي وروتوكسيژن باكتري اشريشيا كلي در مدفوع گاو و مقاومت آنتي‌بيوتيكي آنها در گاوداري‌هاي اطراف شهركرد

Occurrence of verotoxigenic E.coli in cow feces and antimicrobial resistance of the isolates in cattle farms in Shahrekord area

مقدمه: رنگ‌هاي به‌طور معمول اشريشيا كلي در فلور ميكروبي روده حيوانات خونگرم وجود دارد و از راه مدفوع در محيط پراكنده و موجب آلودگي آب، خاك و در نتيجه ميوه و سبزيجات مي شود .سويه‌هاي اشريشيا كلي انتروهموراژيك، گروهي از بيماري‌زاهاي غذازاد و تهديدي براي سلامت عمومي هستند و باعث بروز اسهال خوني و سندروم اورميك هموليتيك (HUS) مي‌شوند. هدف مطالعه حاضر، جداسازي و شناسايي سروتيپ O157: H7 و ساير سويه‌هاي وروتوكسيژن و جستجوي ژنهاي حدت (stx2، stx1، eaeAو rfbE) در كشت سوآب مدفوعي گاو با استفاده از آزمون واكنش زنجيرهاي پليمراز در منطقه شهركرد است. مواد و روش ها: در بهار و تابستان 1394، 400 نمونه سوآب مدفوعي از گاوهاي منطقه شهركرد جمع آوري و به آزمايشگاه ميكروب‌شناسي دانشكده دامپزشكي دانشگاه شهركرد منتقل شدند. پس از انجام مراحل كشت، آزمون‌هاي ميكروبي و بيوشيميايي براي جداسازي باكتري E.coli انجام شدند. از آزمون PCR براي تشخيص سروتيپ O157: H7 و جدايه‌هاي وروتوكسيژنيك با شناسايي ژن هاي rfbE، stx1، stx2 و eaeA استفاده شد. براي تعيين الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي جدايه‌هاي وروتوكسيژن، آزمون آنتي‌بيوگرام براي برخي آنتي‌بيوتيك‌هاي رايج انجام شد. نتايج: سروتيپ O157:H7 از هيچيك از نمونه هاي آزمون‌شده جدا نشد، اگرچه نتايج PCR نشان دادند كه از تعداد 384 سويه جداشده، 104 جدايه (27 درصد) حاوي ژن stx1، 36 جدايه (37/9 درصد) حاوي ژن stx2 و 16 جدايه (4/16 درصد) حاوي هر دو ژن بودند و ژن eaeAدر 280 جدايه (91/72 درصد) وجود داشت. از ميان سويه‌هاي وروتوكسيژنيك، مقاومت آنتيبيوتيكي نسبت به آنتي بيوتيك هاي تتراسايكلين (87/1 درصد)، آمپي‌سيلين (62/51 درصد)، سفتاكسيم (48/38 درصد)، جنتامايسين (25/81 درصد)، سيپروفلوكساسين(3/22 درصد) و سولفامتوكسازول (3/22 درصد) مشاهده شد. بحث و نتيجه گيري: اگرچه سروتيپ O157:H7 در مدفوع گاوها وجود نداشت، ساير جدايه هاي وروتوكسيژن از مدفوع گاو در محيط پراكنده مي‌شوند و نسبت به برخي از آنتي بيوتيك هاي رايج مقاومت زيادي نشان مي‌دهند و بنابراين خطر جدي براي بهداشت انسان محسوب مي‌شوند.

Introduction: Escherichia coli is a common bacterium in the intestinal microflora of warm-blooded animals. They are routinely shed into the environment through feces and can contaminate water and soil, and, consequently fruits and vegetables .Enterohemorrhagic E. coli strains are recently emerged group of food-borne pathogens that are a significant public health threat. This group causes bloody diarrhea and hemolytic uremic syndrome (HUS), and the disease is prevalent in developed countries. The purpose of this study was to isolate and identify the E.coli O157: H7 and other verotoxigenic ones and major virulence genes (rfbE, eaeA, stx1, stx2) in fecal swab samples by PCR in Shahrekord area. Materials and methods: In Spring and Summer 2015, 400 cow fecal swab samples were collected from farms in Shahrekord area. Bacteriological and biochemical examinations were done for detection of E.coli. PCR assay was done for identification of O157:H7 serotype and other verotoxigenic E. coli using rfbE, eae, stx1 and stx2 genes. Results: E. coli O157:H7 was not detected in any strains tested. But PCR showed that out of 384 E.coli strain, 104(27/08%) isolates carried stx1 gene, 36(9/37%) carried stx2 gene and 16 (4.16%) carried both stx1 and stx2 genes. Intimin (eaeA) gene was detected in 280(72/91%) of the isolates. Among verotoxigenic strain antibiotic resistance to Tetracycline 87/1%, Ampiciline 51/62%, Cefotaxime 48/38%, Gentamycin 25/81%,, Ciprofeloxacin 3/22% and Sulfamethoxazol 3/22% were observed. Discussion and conclusion: According to the results, although the serotype O157: H7 did not isolate from the feces of cattle but other verotoxigenic strains that showed high resistance to antibiotic were isolated so it is a risk for human health.