بررسي شيوع و تعيين ژنوتايپ ويروس هپاتيت دلتا در بيماران HBs Ag مثبت مراجعه‌كننده به كلينيك تخصصي بعثت كرمان طي سال‌هاي 92-1391

Prevalence and Genotyping of Hepatitis D Virus among HBs Ag Positive Patients Referred to Besat Clinic, Kerman during 2012-2013

مقدمه: عامل هپاتيت دلتا، ويروسي با ميانگين قطر 35 نانومتر است كه جهت تكثير و تجمع به آنتي‌ژن سطحي ويروس هپاتيت B وابسته است. عفونت با عامل دلتا مي‌تواند هم‌زمان با عفونت ويروس هپاتيت B رخ دهد. در اين‌صورت معمولاً سبب هپاتيت حاد مي‌گردد و يا به شكل عفونت ثانويه در بيماران مبتلا به ويروس هپاتيت B بروز مي‌نمايد. ويروس هپاتيت دلتا داراي ژنوتيپ‌هاي مختلفي بر اساس آناليز توالي ژنوم است كه تظاهرات باليني و گستره جغرافيايي متنوعي را از خود نشان مي‌دهند. هدف از اين مطالعه، تعيين شيوع و ژنوتيپ ويروس هپاتيت دلتا در بيماران HBsAg مثبت است. روش بررسي: اين مطالعه از نوع بررسي مقطعي و توصيفي بوده و بر روي 400 نفر بيمار HBsAg مثبت انجام پذيرفت. تعيين ژنوتايپ با استفاده از واكنش زنجيره پليمراز وهضم آنزيمي با روش(Restriction Fragment Length Polymorphism) RFLP انجام شد. در آخر نيز تعيين سكانس نمونه‌ها براي تائيدنتايج حاصل ازRFLP انجام شد. نتايج: از بين 400 بيماري كه در اين تحقيق بررسي شد، 67 مورد(75/16%) داراي آنتي‌بادي برضد HDV بودند كه از ميان آنها 7 مورد(75/1%) HDV RNA در نمونه سرمي تشخيص داده شد. با بررسي توالي‌ها توسط آنزيم‌هاي برشي و آناليز سكانس اين 7 نمونه، ژنوتايپ همه از نوع I تعيين گرديد. نتيجه‌گيري: آناليز سكانس ناحيه C-ترمينال ويروس هپاتيت دلتا و مقايسه آن با ايزوله‌هاي ساير كشورها، نشان از يكسان بودن ژنوتايپ ويروس با كشورهاي همجواري چون تركيه، مصر، اردن و پاكستان دارد.احتمالا اين يافته‌ها مي‌تواند حاكي از منشأ يكسان ويروس دلتا در منطقه خاورميانه داشته باشد.

Introduction: Hepatitis D virus (HDV) is a 35 nm in diameter agent that depends on hepatitis B surface antigen in order to proliferate and accumulate. Infection with delta agent can occur spontaneously with hepatitis B virus infection and it cause acute hepatitis or develop as secondary infection in the patients with hepatitis B. Hepatitis D virus (HDV) has several genotypes based on genome sequence analysis, which shows a variety of clinical protests and geographical scope. The aim of this study was to determine the prevalence of hepatitis delta virus genotype in patients with positive HBs Ag. Methods: This cross-sectional and descriptive study was performed on 400 HbsAg-positive patients. Genotype identification was performed using polymerase chain reaction and RT-nested PCR and RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). Finally sample sequencing was considered to approve RFLP gained results. Results: Among 400 patients in this study, 67 participants (16.75 %) were containing anti-HDV antibody, and it was found HDV RNA in just 7 (1.75%) serum samples. By examining the sequences using analysis of these 7 positive HDV RNA samples by restriction enzyme and MEGA4 software showed that all of them have genotype I. Conclusion: Sequence analysis of C-terminal region of Hepatitis D virus (HDV) and its comparison with other countries showed that it was the same genotype that present in countries such as Turkey, Egypt, Jordan and Pakistan. These finding indicated that there was the same origin of Hepatitis D virus (HDV) in Middle East.