بررسي تأثير عصاره هيدروالكلي گياه زبانبره بر روي تكثير و آپوپتوز در سلول‌هاي بنيادي عصبي مشتق از هيپوكمپ

Effect of Hydroethanolic Extract of Stachys Byzantina on Cell Proliferation and Apoptosis in Hippocampus-Derived Neural Stem Cells

سابقه و هدف: يكي از مهم‌ترين موضوعات در زمينه سلول‌ درماني، استفاده از يك محرك مناسب براي افزايش تكثير سلو‌ل‌هاي بنيادي عصبي است. اين مطالعه، به‌منظور ارزيابي تأثير عصاره هيدروالكلي گياه زبانبره بر روي روند تكثير و آپوپتوز سلول‌هاي بنيادي عصبي هيپوكمپ نوزاد موش صحرايي انجام شده است. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي، سلول‌هاي بنيادي عصبي به روش هضم آنزيمي از هيپوكمپ مغز نوزاد سه روزه موش صحرايي جداسازي و سپس نوروسفرها به سلولهاي انفرادي شكسته شدند و در پليتهاي كشت چسبنده، كشت انجام شد. بررسي نشانگر اختصاصي نستين به روش ايمنوسيتوشيمي صورت گرفت. سلول‌هاي بنيادي عصبي به مدت 48 ساعت با غلظت‌هاي گوناگون از عصاره هيدروالكلي گياه زبانبره و سپس μM 125 هيدروژن پراكسايد به مدت 30 دقيقه تيمار شدند. ميزان بقاي سلولي و آپوپتوز بهترتيب با روش MTT و كيت تانل ارزيابي گرديد. آناليز داده‌ها با كمك نرم‌افزار آماري SPSS 15 و آزمون‌هاي ANOVA و Tukeys صورت گرفت. يافته‌ها: نتايج به‌دست‌آمده در اين مطالعه نشان داد كه تيمار سلولهاي بنيادي عصبي با µg/ml 800 از عصاره هيدروالكلي گياه زبان‌بره، موجب افزايش معني‌دار تكثير سلول‌هاي بنيادي عصبي در مقايسه با گروه كنترل مي‌شود. همچنين، نتايج رنگ‌آميزي تانل نشان داد كه اين عصاره، تأثير حمايتي در برابر آپوپتوز القاشده توسط پراكسيد هيدروژن ندارد. استنتاج: عصاره هيدروالكلي گياه زبانبره مي‌تواند سبب افزايش تكثير سلول‌هاي بنيادي عصبي در شرايط آزمايشگاهي شود؛ ولي تحقيقات بيشتري نياز است تا ارزش اين عصاره گياهي، در زمينه درمان برخي بيماري‌هاي تحليل‌برنده عصبي استنباط شود.

Background and purpose: The use of an appropriate stimulus for increasing the rate of neural stem cell proliferation is one of the most important issues in cell therapy. This study aimed to investigate the effect of hydroethanolic extract of Stachys byzantina on hippocampus-derived neural stem cell proliferation and apoptosis. Materials and methods: In this experimental study, the neural stem cells were isolated from the hippocampus region of brain using enzymatic digestion. The neurospheres were dissociated to single cells and cultured on adherent plates. For these cells, immunocytochemical evaluation was performed for marker nestin. The isolated neural stem cells were pretreated with different doses of hydroethanolic extract of Stachys byzantina for 48 h, and then exposed to 125 μM of H2O2 for 30 min. The effects of this extract on cell survival and apoptosis were evaluated using MTT and TUNEL, respectively. To analyze the data, ANOVA and Tukey’s tests were run in SPSS, version 15. Results: In the current study, 800 µg/ml of Stachys byzantina extract significantly increased the proliferation rate of the neural stem cells. Furthermore, the results of the TUNEL staining demonstrated that Stachys byzantina extract did not have any protective effect on hydrogen peroxide-induced apoptosis. Conclusion: Stachys byzantina extract increases the rate of neural stem cell proliferation. However, further studies are required to determine the effect of this extract on the treatment of neurodegenerative diseases.