مروري بر تكنيك هاي مولكولي در شناسايي سريع موتاسيون هاي منجر به مقاومت آزولي در قارچ هاي پاتوژن شايع

Molecular Techniques in Detection of Triazole Resistance Gene Mutations in Common Pathogenic Fungi

كانديديازيس و آسپرژيلوزيس تهاجي به عنوان يك معضل بهداشتي منجر به عفونت‌هايي با مرگ و مير بالا در بيماران مستعد با ضعف سيستم ايمني مي‌شوند. مديريت درمان موفقيت‌آميز اين بيماري‌ها، وابسته به شروع به موقع درمان، انتخاب داروي مؤثر ضد قارچي و شناسايي مقاومت‌هاي دارويي مي‌باشد. با توجه به كاهش حساسيت طيف وسيعي از اين پاتوژن‌ها به داروهاي ضد قارچي در طول دهه‌هاي اخير، شناسايي سريع موتاسيون‌هاي منجر به مقاومت دارويي در گونه‌هاي قارچي پاتوژن واجد اهميت است. عمدتاً مطالعات صورت گرفته جهت شناسايي موتاسيون هاي منجر به مقاومت دارويي نيازمند روش‌هاي پيچيده و ابزارهاي گران قيمت از جمله PCR و يا تعيين توالي مي‌باشد. هرچند كه امروزه استفاده از تكنيك‌هاي دقيق، سريع و با حساسيت بالا از جمله تكثير دايره‌اي چرخان RCA)، PCR-RFLP، Real-Time PCR )و ARMS-PCR جهت رديابي توالي هدف شامل پلي مورفيسم‌هاي نوكلئوتيدي را حتي در حد يك جفت باز فراهم مي‌آورد. در مقاله مروري حاضر سعي شده كه نحوه استفاده، مزايا و معايب اين تكنيك‌ها در جهت شناسايي موتاسيون‌هاي احتمالي ايزوله‌هاي مقاوم به داروهاي آزولي مورد بحث قرار گيرد.

Invasive candidiasis and aspergillosis are amongst major medical concerns with high mortality among immunocompromised patients. Management of these infections is dependent on early and efficient antifungal therapy, as well as drug resistance monitoring. Decreased sensitivity of these pathogens to antifungal drugs during recent decades calls for rapid detection/identification of drug resistance associated mutations in pathogenic fungal species. Generally, a study for identification of drug resistance associated mutations requires complicated and expensive methods such as PCR or sequencing. However, nowadays application of accurate, fast and highly sensitive techniques, including Rolling Circle Amplification (RCA), PCR-RFLP, Real-Time PCR, and ARMS-PCR provide the possibility for detection of target sequence containing nucleotide polymorphisms even at the one base pair level. In this review we aimed to discuss the usage, advantages and disadvantages of these techniques in order to identify the mutations of the azole-resistant strains.