تاثير عصاره متانولي گياه آقطي ((Sambucus ebulus برروند تكثير سلول هاي بنيادي عصبي در شرايط آسيب اكسيداتيو پراكسيد هيدروژن

Effect of Sambucus ebulus extract on neural stem cell prolifration under oxidative stress condition

زمينه و هدف: مطالعات متعددي نشان مي دهند كه سيستم اعصاب مركزي داراي قابليت ترميم اندوژنوس مي باشد. اما ميزان تكثير سلول هاي بنيادي عصبي اندوژنوس جهت درمان بيماريهاي نورودژنراتيو كافي نمي باشد. لذا به نظر مي رسد كه تحريك تكثير سلول هاي بنيادي عصبي اندوژنوس جهت ترميم نوروني الزامي است. هدف از اين مطالعه بررسي تاثيرتكثيري عصاره گياه آقطي بر سلول هاي بنيادي عصبي مشتق از هيپوكمپ موش صحرايي تازه بدنيا آمده در شرايط آسيب اكسيداتيو پراكسيد هيدروژن است. روش بررسي: سلول هاي بنيادي عصبي از هيپوكمپ مغز نوزاد موش صحرايي تازه متولد شده استخراج و كشت شدند. ماهيت عصبي اين سلولها با استفاده از بيان نشانگر خاص عصبي Nestin و از طريق تكنيك ﺍﻳﻤﻮﻧﻮﺳﻴﺘﻮﺷﻴﻤﻲ مورد ﺍﺭﺯﻳﺎﺑﻲ قرار گرفت. جهت ايجاد شرايط اكسيداتيو در محيط كشت سلولي، 5×104 سلول را به هر يك از چاهك هاي پليت 96 خانه منتقل و سپس، هيدروژن پراكسيد اضافه شد. بعد از 24 ساعت تست زنده ماني انجام و توسط دستگاه مقدار جذب هر گروه ارزيابي شد. سپس سلول هاي بنيادي عصبي به مدت 24 ساعت تحت تيمار غلظت هاي مختلف (100، 200، 400 و 500 (ميكروگرم بر ميلي ليتر عصاره آقطي به ميزان 50 ميكرون قرار گرفتند. درصد تكثير سلولي با استفاده از MTT بررسي شد. يافته ها: بررسي هاي ايمونو فلورسنت نشاندهنده بيان ماركر اختصاصي نستين در سلولهاي بنيادي عصبي مشتق از هيپوكمپ موش صحرايي بود. نتايج تحقيق حاضر مويد كاهش ميزان زنده ماني سلول ها در غلظت هاي مختلف H2O2 بود. درصد تكثير سلول هاي بنيادي عصبي طي شرايط آسيب اكسيداتيو پراكسيد هيدروژن در گروههاي تيماربا عصاره گياه آقطي نسبت به گروه كنترل بيشتر بود. بيشترين ميزان تكثير سلول ها در غلظت 500 μg/ml مشاهده شد. نتيجه گيري: اين يافته ها نشان مي دهند كه عصاره متانولي آقطي مي تواند ميزان تكثير و بقاي سلول هاي بنيادي عصبي را در شرايط آزمايشگاهي و طي شرايط آسيب اكسيداتيو بهبود ببخشد و به نظر مي رسد كه قابليت بالقوه اي در روند ترميم عصب داشته باشد.

Background and Aim: Recently, several studies have indicated that the central nervous system has the capacity for endogenous repair. But, the proliferation capacity of endogenous neural stem cells (NSCs) isn’t sufficient for the treatment of neurodegenerative diseases. So, it sounds that stimulation of endogenous NSC proliferation is essential for neuroregeneration. The aim of this study was to examine the effects of Sambucus ebulus extract on the proliferation of neonatal rat hippocampus-derived neural stem cells (NSCs) under oxidative stress condition induced by H2O2. Material and Methods: The NSCs were isolated from neonatal rat hippocampus. To confirm neural characteristics of neural stem cells, the expression of neural-specific marker, Nestin was investigated by immunocytochemistry technique. 5×104 cells were cultured in every well of a 96 well plate and H2O2 was added to induce oxidative stress condition. Then NSCs were exposed to 50 μg Sambucus ebulus extract for 24 hours, at various concentrations (25, 50, 100, 200, 400 and 500 μg/ml). The cell proliferation rate was assessed by MTT colorimetry assay before and after treatment with the extract. Results: Immunofluorescent studies showed that neural stem cells expressed specific neural marker; Nestin. The proliferation rate of NSCs increased in the treated groups in comparison to that in the control group. The highest rate of survival was observed when Sambucus ebulus was used at the concentration of 500 μg/ml. (P<0.05). Conclusion: The results showed that the methanolic extract of Sambucus ebulus can promote proliferation and survival of NCSs in vitro and also after exposure to oxidative stress condition, suggesting its potential beneficial effect on neuroregeneration.