پيوند سلول هاي پيش ساز عصبي مشتق از سلولهاي بنيادي مغز استخوان به كورپوس كالوزوم دميلينه شده موش صحرايي

Transplantation of bone marrow stem cell-derived neuroprogenitor into demyelinated rat corpus callosum

زمينه و هدف: سلول هاي بنيادي مغز استخوان به عنوان منبع مناسبي براي سلول درماني و ترميم بيماريهاي نورودژنراتيو هستند. در اين مطالعه تجربي سلول‌هاي بنيادي مغز استخوان موش به سلول‌هاي پيش ساز عصبي تمايز يافته و بهبود ميلين سازي پس از پيوند آنها به موش صحرايي مدل دميلينيشن ارزيابي شد. روش بررسي: سلول هاي بنيادي مزانشيمي با روش فلاشينگ از مغز استخوان فمور رت استخراج شدند. سلول هاي بنيادي مزانشيمي در محيط كشت DMEM حاوي FBSكشت داده شدند. جهت القا پري كاسور شبه عصبي از القاگرهاي رتينوئيك اسيد و EGF و bFGF استفاده شد. ماركرهاي سلول هاي پيش ساز عصبي يعني NF68، Nestin با روش ايمونوسيتوشيمي پس از مرحله تمايز بررسي شدند. درمرحله in vivo به منظور القا مدل دميلينيشن گليوتوكسين ليزوليسيتين به كورپوس كالوزوم توسط تزريق استريوتاكسيك انجام شد. يك هفته بعد پيوند سلول‌هاي پيش ساز عصبي نشاندارشده با DiIبه صورت درجا به موش انجام شد. ارزيابي تغييرات وسعت دميلينيشن و جايگزيني سلول‌هاي پيوندي توسط بررسي‌هاي هيستولوژي وايمونوهيستوشيمي حدودا 2هفته پس از پيوند سلول انجام شد. يافته‌ها: تغييرات مورفولوژيكي عصبي در گروه­هاي تيمار قابل مشاهده بودند. بيان ماركرهاي خاص عصبي NF68 ، Nestin با روش ايمونوسيتوشيمي تمايز سلول‌هاي بنيادي مغز استخوان درپايان مرحله القا تاييد كرد. يافته‌هاي هيستولوژي و ايمونوهيستوشيمي نشان دهنده كاهش معنادار وسعت دميليناسيون در گروه پيوند سلول نسبت به گروه كنترل بود. نتيجه گيري: سلول‌هاي بنيادي مغز استخوان قابليت تمايز عصبي درشرايط كشت را با استفاده از القاگرهاي عصبي دارند و باعث بهبود ميلين سازي پس از پيوند به موش صحرايي مدل دميلينيشن مي شود.

Background and Aim: Bone marrow stem cells (BMSCs) are recognized as appropriate source for cell therapy in neurodegenerative disorders. In this exprimental study, neuroprogenitor cells (NPC)-derived from BMSCs were transplanted into an animal demyelination model. Material and Methods: BMSCs were isolated from femur bones of the rats and cultured in DMEM medium containing FBS. BMSCs were differentiated into NPC by inducers such as; RA, bFGF and EGF. Specific neuroprogenitor markers, e.g.:Nestin and NF68 were detected by using immunocytochemistry technique. Demyelination model was induced via injection of gliotoxin lysolecithin (LPC) into the corpus callosum. After one week, Dil labled NPCs were transplanted into the rat brains. The extention of demyelination and cell homing were measured 2 weeks later by histological and immunohistochemical staining. Result: BMSCs were appeared with neurologic morphology and differentiation of the cells into NPC after exposure to neural inducers was confirmed by immunocytochemistry staining. Histological and immunohistochemical evaluation showed significant decrease in demyelination in the experimental group. Conclotion: The results of this study demonstrated that transplantation of NPC-derived BMSCs led to significant remyelination in demylinted corpous callosum.