بررسي اثرات ضد سرطاني سنه سيونين و پيرگياه در رده هاي سلولي سرطاني پروستات

Anticancer Effects of Senecionine and Senecio vulgaris L. on Prostate Cancer Cell Lines

سابقه و هدف: در اين مطالعه، اثرات تركيب سنه سيونين و عصاره پيرگياه( Senecio vulgaris ) بر آپوپتوز و مهار سلولي ارزيابي شده است هم چنين سميت سلولي آن‌ها بر روي سلول‌هاي سرطاني پروستات (PC3، DU145 و HGFs)، اثرات آنتي‌اكسيداني و اثرات آن‌ها در بيان ژن‌هاي گيرنده‌هاي آندروژن(AR) و كلاسترين(CLU) نيز مورد بررسي قرارگرفته است. مواد و روش‌ها: اين مطالعه از نوع تجربي بوده است. سنه سيونين و عصاره اندام هوايي پيرگياه تهيه شدند. سپس تغييرات مورفولوژيك ايجاد شده توسط آن‌ها بر روي رده‌هاي سلولي سرطاني پروستات،‌ در محيط كشت DMEM F12 پس از 24، 48، 72، و 96 ساعت با ميكروسكوپ معكوس بررسي شدند. درصد زنده ماندن رده هاي سلولي و ميزان آپوپتوز نيز به ترتيب توسط آزمون MTT و آناليز فلوسايتومتري و چگونگي بيان ژن‌هاي گيرنده AR و CLU با روش Real-time PCR و هم چنين نحوه متيلاسيون (methylation) ژن AR با تست بي‌سولفيت بررسي شدند. يافته‌ها: نتايج بررسي سميت سلولي نشان داد كه پس از 24 ساعت تيمار با سنه سيونين، تغييرات مورفولوژيك در هر سه رده سلولي و در هريك از چهار غلظت فوق مشاهده شد به طوري كه با گذشت زمان اين تغييرات تشديد شدند. نتايج آزمون MTT نشان داد كه سنه سيونين در غلظت μg/ml 50 و 500 داراي اثرات سايتوتوكسيك بر سلول‌هاي سرطان پروستات PC3 و DU145 است. استنتاج: بر اساس نتايج، عصاره اندام هوايي پيرگياه در غلظت مذكور با كم‌ترين آسيب به سلول‌هاي طبيعي و تخريب و القاي آپوپتوز سلولي با هدف درمان سرطان پروستات براي مطالعات in vivo پيشنهاد مي‌شود.

Background and purpose: This research aimed at evaluating the effects of senecionine and Senecio vulgaris extract on apoptosis and cell cycle inhibition. Also, their cytotoxicity on prostate cancer cell lines (PC3, DU145 and HGFs), antioxidant effects, and influences on AR and CLU gene expression were investigated. Materials and methods: In this experimental study, senecionine and S. vulgaris extract were prepared and the induced morphological changes on cell lines were evaluated in DMEM F12 cell culture after 24, 48, 72, and 96 hours by an invert microscope. Then, cell viability and apoptosis were determined by MTT and fluorescence analysis, respectively. Finally, AR and CLU gene expression and methylation of AR gene were evaluated using Real-time PCR and Bi-Sulfide test, respectively. Results: Cytotoxicity data showed morphological changes 24 hours after treatment with senecionine in all cell lines and all concentrations which also increased in longer time. Based on MTT results, senecionine showed cytotoxicity in 50 and 500 μg/ml on PC3 and du145 prostate cancer cell lines. Conclusion: According to current findings, Ragwort aerial part extract are suggested for in vivo studies with minimum destruction on normal cells and inducing effects on destruction and apoptosis of prostate carcinogenic cell lines.