اثر بربرين بر بيان ژن Bcl-2 در بيماران لوسمي لنفوسيتي مزمن در مقايسه با گروه كنترل

Effect of Berberine on Bcl-2 Expression in Chronic Lymphocytic Leukemia Compared with Healthy Controls

سابقه و هدف: پروتئين ضد آپوپتوزي Bcl-2 از وقوع آپوپتوز از طريق مسير ميتوكندريايي جلوگيري كرده و بيان بالاي اين پروتئين، براي بقاي سلول‌‌هاي توموري بيماران مبتلا به لوسمي لنفوسيتي مزمن (CLL) ضروري است. بربرين يك آلكالوئيد است كه منجر به القاي آپوپتوز سلول‌‌هاي سرطاني از طريق مسير ميتوكندريايي مي‌گردد. مطالعه حاضر با هدف ارزيابي اثر بربرين بر ميزان بيان ژن Bcl-2 در سلول‌‌هاي تك هسته ‌اي خون محيطي (PBMCs) افراد مبتلا به CLL در مقايسه با افراد سالم در محيط In vitro انجام پذيرفت. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه تجربي، خون محيطي از 12 فرد مبتلا به CLL و 6 فرد سالم گرفته شد. PBMCs با استفاده از فايكول جداسازي، و در دو گروه تيمار شده با بربرين (μM 25) و تيمار نشده براي 48 ساعت كشت داده شد. بيان ژن Bcl-2 به دنبال استخراج RNA و سنتز cDNA با استفاده از Real-time PCR و روش سايبرگرين در هر دو گروه مورد سنجش قرار گرفت. يافته‌ها: سطح بيان ژن Bcl-2 در افراد مبتلا به لوسمي لنفوسيتي مزمن تحت تأثير بربرين نسبت به گروه تيمار نشده، به‌طور قابل توجهي پايين‌تر بود (05/0 p<)، در حالي‌ كه تفاوت معني‌داري در افراد سالم تحت تأثير بربرين و گروه كنترل (بدون دارو) مشاهده نشد. استنتاج: فعاليت آپوپتوزي بربرين ممكن است از طريق كاهش بيان ژن Bcl-2 در سلول‌‌هاي توموري CLL ميانجي‌گري شود. با توجه به نقش اساسي پروتئين Bcl-2 در بقاي سلول‌هاي توموري، اين محتمل است كه بربرين به عنوان يك تركيب بالقوه طبيعي باز دارنده فعاليت ژن Bcl-2، مي‌‌تواند يك گزينه درماني براي CLL مطرح باشد.

Background and purpose: Anti-apoptotic protein Bcl-2 prevents apoptosis through the mitochondrial pathway and high-level expression of Bcl-2 is required for survival of chronic lymphocytic leukemia (CLL). Berberine (BBR) is an alkaloid that induces apoptosis of cancer cells via mitochondrial pathways. The aim of this study was to investigate the effect of Berberine on Bcl-2 gene expression in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of CLL patients compared to healthy subjects in vitro. Materials and methods: In this experimental study, peripheral blood was obtained from 12 CLL patients and six age-matched healthy subjects. PBMCs were isolated by Ficoll separation and were cultured in two groups for 48 hours incubation; treated with Berberine (25 μM) and untreated. Finally, Bcl-2 gene expression was investigated in both groups following RNA extraction and cDNA synthesis by Real time PCR using SYBR Green method. Results: Bcl-2 gene expression levels in CLL patients treated with Berberine were significantly lower than those of the untreated group (P<0.05), but no significant differences were found between healthy subjects treated with Berberine and control group. Conclusion: The apoptotic activity of Berberine may be mediated through the reduction of Bcl-2 mRNA expression level in leukemic cells of CLL. Considering the major role of Bcl-2 in survival of tumor cells, Berberine could be considered as a natural therapeutic option for CLL.