اثر درماني محيط كشت‌ حاصل از سلول‌هاي بنيادي‌ مزانشيمي مشتق از بافت چربي بر تغييرات هيستومورفومتريك بيضه موش در مدل آزواسپرمي القايي با بوسولفان

Healing Effect of Conditioned Medium of Adipose Tissue- Derived Mesenchymal Stem Cells on Histomorphometric Changes of Mice Testis in Busulfan Induced-Azoospermia Model

اهداف: محيط كشت رويي سلولهاي بنيادي مزانشيمي به‌دليل دارابودن متابوليتها، فاكتورهاي رشد و سيتوكين ها تاثير مثبتي در ترميم بافته اي آسيب‌ديده دارد. هدف مطالعه حاضر، بررسي اثر درماني محيط كشت حاصل از سلول هاي بنيادي مزانشيمي مشتق از بافت چربي بر تغييرات هيستومورفومتريك بيضه موش تحت تيمار با بوسولفان بود. مواد و روش ها: در اين مطالعه تجربي، 18 سر موش سوري نر بالغ به‌طور تصادفي به سه گروه كنترل (بدون تيمار)، شاهد آزواسپرمي و تجربي تقسيم شدند. گروه‌هاي شاهد و تجربي با دو تزريق درون‌صفاقي بوسولفان با دوز 10ميلي‌گرم بر كيلوگرم به‌فاصله 21 روز دچار آزواسپرمي شدند. گروه تجربي، 35 روز پس از تزريق دوم بوسولفان، تحت درمان با محيط كشت رويي سلولهاي بنيادي مزانشيمي مشتق از بافت چربي قرار گرفت و پس از 60 روز از تزريق محيط كشت رويي، بيضه موش‌ها جدا و بررسي هيستومورفومتريك انجام شد. نتايج توسط نرم‌افزار SPSS 18 و به‌كمك آزمون هاي آناليز واريانس يك‌طرفه، تعقيبي توكي و من‌ويتني تحليل شدند. يافته ها: قطر و مساحت لومني لوله هاي منيساز در سه گروه اختلاف معني داري با يكديگر نداشتند، اما در گروه تجربي قطر كلي، ضخامت و مساحت سلولي، مساحت مقطع عرضي و شاخص اسپرماتوژنز لوله هاي منيساز نسبت به گروه كنترل كاهش معني‌دار (p<0/05)و نسبت به گروه شاهد آزواسپرمي افزايش معني‌دار نشان دادند (p<0/001). همچنين تعداد و تراكم عددي لوله هاي منيساز در گروه شاهد آزواسپرمي نسبت به گروه‌هاي كنترل و تجربي افزايش معنيداري داشت (p<0/001). نتيجه گيري: فاكتورهاي ترشحي محيط كشت رويي حاصل از سلول هاي بنيادي بافت چربي ميتواند در ترميم اسپرماتوژنز در موش هاي نابارورشده با بوسولفان موثر باشد.

Aims Conditioned medium of mesenchymal stem cells have a positive effect on repairing damaged tissues because of having metabolites, growth factors and cytokines. The aim of current study was to investigate the healing effect of conditioned medium of adipose tissuederived stem cells on histomorphometric changes of testis in treated mice with busulfan. Materials & Methods In this experimental study, 18 adult male mice were divided into the three equal groups including control group (Without treatment), azoospermia sham and experimental groups. The sham and experimental groups were induced azoospermia by two injection of 10mg/kg busulfan intraperitoneally, with 21 days interval. 35 days after the second injection of busulfan, the experimental group treated with conditioned medium of adipose tissue-derived stem cells, and 60 days after conditioned medium injection, the testes of mice were removed and histomorphometric evaluation was done. The results were analyzed by SPSS 18 software using Mann-Whitney, ANOVA and Tukey’s post hoc tests. Findings The lumen diameter and area of the seminiferous tubules in the three groups did not have any significant difference; however, the total diameter, cellular diameter, cellular area, cross-sectional area and spermatogenesis index of the seminiferous tubules were significantly decreased in the experimental group compared to the control group (p<0.05), while they were significantly increased compared to the azoospermia sham group (p<0.001). Also, the number of tubules and numerical density of the seminiferous tubules were significantly increased in the azoospermia sham compared to the control and experimental groups (p<0.001). Conclusion Secretory factors of conditioned medium from adipose tissue-derived stem cells could be effective in the restoration of spermatogenesis in busulfan-induced infertile mice.