بررسي جهش در اگزون هاي 27و 29 ژن MYBPC3 به روش PCR-SSCP/HA در بيماران كارديوميوپاتي هايپرتروفي استان چهارمحال و بختياري

investigation of mutation in Exon 27 and exon 29 of MYBPC3 gene by using PCR-SSCP/HA in cardiomyopathic hypertrophy patients in chahahrmahal va bakhtiari province

زمينه و هدف: كارديوميوپاتي هايپرتروفي (HCM) رايج ترين نوع بيماري قلبي با وراثت تك ژني است كه با ضخيم شدن ديواره بطن چپ، اختلال عملكرد انقباضي و آريتمي هاي بالقوه كشنده مشخص مي شود. پيشرفت هاي زيادي در روشن سازي اساس ژنتيكي HCM به عمل آمده و در نتيجه بيش از 900 جهش منحصر به فرد در بيش از 20 ژن شناسايي شده است. جهش در ژن MYBPC3 ( كه كد كننده پروتئين C متصل شونده به ميوزين قلبي است)، عامل حدود 40٪ از موارد باليني HCM است. اين مطالعه با هدف بررسي احتمال وجود جهش در اگزون هاي 27 و 29 ژن MYBPC3 در بيماران مبتلا به HICM در استان چهار محال و بختياري انجام شد. روش بررسي: 30 فرد مبتلا به HCM مراجعه كننده به كلينيك قلب دانشگاه علوم پزشكي شهركرد در نظر گرفته شد و به منظور استخراج DNA از نمونه هاي خون اين بيماران از روش استاندارد فنل - كلروفرم استفاده شد. با استفاده از روش واكنش هاي زنجيره اي پليمراز اگزون هاي 27 و 29 تكثير شدند و با روش چند شكلي فضايي تك رشته اي (SSCP) به صورت تك رشته اي تبديل شدند و همراه با نمونه اي 2 رشته اي روي ژل پلي اكريل آميد الكتروفورز شدند. يافته ها: DNA استخراج شده الكتروفورز و نسبت جذب آن ها اندازه گيري شد كه نتايج آن ها نشان دهنده ي استخراج مناسب و كيفيت مطلوب DNA مي باشد. با بررسي نتايج حاصل از الكتروفورز چند شكلي فضايي تك رشته اي SSCP / HA در هيچ يك از نمونه ها تغييري در اگزون 27 و 29 ژن MYBPC3 مشاهده نشد. نتيجه گيري: هيچ كدام از بيماران مورد مطالعه در اگزون هاي 27 و 29 ژن MYBPC3 جهش نداشتند. بر اساس نتايج حاصل از اين مطالعه در بيماران مبتلا به HCM با توارث اتوزومي غالب هيچ گونه تغييري در اگزون 27 و 29 ژن MYBPC3 مشاهده نشد. نتيجه گيري مي شود كه اگزون هاي 27 و 29 ژن MYBPC3 در ايجاد بيماري HCM در بيماران مورد مطالعه نقش ندارند.

Background and aims: Hypertrophy cardiomyopathy (HCM) is the most common type of heart disease with monogenic inheritance distinguished by thickening of left ventricle, contractile dysfunction and potentially fatal arrhythmias. Great progress in clarifying the genetic basis of HCM obtained. It was identified more than 900 unique mutations in 20 genes. Mutations in the gene MYBPC3 (which encodes the cardiac Myosin binding protein C) are about 40% of clinical cases. This study aimed to investigate the presence of mutations in exons 27 and 29 of MYBPC3 gene in patients with hypertrophy cardiomyopathy in Chahar Mahal and Bakhtiari province. Methods: 30 probands of hypertrophy cardiomyopathy were selected from patients referred to cardiac clinic of the Shahrekord Medical University. To extract DNA from blood samples of patients we used standard phenol – chloroform protocol. The exons 27 and 29 were amplified by Polymerase Chain Reaction and were converted to single-stranded with Single Strand Conformation Polymorphism and they electrophoresed with double-stranded samples on polyacrylamide gels. Results: Extracted DNA was electrophoresed and the attraction ratio was examined and the outcomes indicate that the DNA extraction and quality of samples are respectable. By investigation of obtained results from SSCP/HA electrophorese in Polyacrylamide, no change was found in exons 27 and 29 of MYBPC3. Conclusion: Any of the patients had no mutation in exons 27 and 29 gene MYBPC3. Based on the results of this study there is no mutation in exons 27 and 29 gene MYBPC3 of HCM patients with autosomal dominant inheritance. It concluded that exons 27 and 29 of MYBPC3 do not have any role to cause HCM in examined patients.