جداسازي هم زمان ژن هاي حدت gyrB, oprL, ETA سودوموناس آئروژينوزا جدا شده از نمونه هاي باليني مراكز درماني استان كرمان با روش PCR-Multiplex

Isolation Virulence genes ETA, OPrL, gyrB in Pseudomonas aeruginosa clinical samples from hospitals in Kerman by Multiplex-PCR

زمينه و هدف: سودوموناس آئروژينوزا يك پاتوژن فرصت طلب و عامل عفونت هاي بيمارستاني و مرگ و مير به خصوص در بيماران با ضعف سيستم ايمني مي باشد و مقاومت ذاتي به مواد ضد ميكروبي منجر به مشكلاتي در درمان عفونت هاي آن مي شود. هدف از اين مطالعه بررسي فراواني ژن هاي حدت سودوموناس آئروژينوزا به روش Multiplex-PCR مي باشد. روش بررسي: 60 نمونه سودوموناس آئروژينوزا شامل 40 نمونه از كلكسيون آزمايشگاه ميكروبيولوژي پاسارگاد و 20 نمونه از بيمارستان هاي استان كرمان جمع آوري و در محيط هاي اختصاصي كشت داده و با آزمون هاي بيوشيميايي تأييد شد. واكنش PCR بر روي تمامي نمونه ها براي شناسايي ژن هاي حدت gyrB, oprL, ETA و شناسايي جنس و گونه 16SrDNA صورت گرفت. يافته ها: از ميان 60 نمونه سودوموناس آئروژينوزا، 38 نمونه (3/63%) داراي ژن gyrB و oprL، 37 نمونه (61/6%) داراي ژن ETA و هر 60 نمونه (100%) داراي ژن 16SrDNA بودند. نتيجه گيري: با توجه به اهميت تشخيص سريع اين باكتري به جهت بروز مقاومت و مشكلات موجود در روش هاي بيوشيميايي، شناسايي همزمان چندين ژن با روش Multiplex-PCR به­عنوان روشي حساس و دقيق در شناسايي اين باكتري به شمار مي رود.

Background and aims: Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen causing nosocomial infections and mortality, especially in patients with a weakened immune system and leads to problems inherent resistance to antimicrobial agents in the treatment of infections. The aim of this study was to evaluate the prevalence of Pseudomonas aeruginosa virulence genes in Multiplex-PCR method. Methods: A total of 60 samples of Pseudomonas aeruginosa including 40 samples from Passargad microbiology lab collection and 20 samples of hospitals in Kerman collected and cultured in specific media and were confirmed with biochemical tests. PCR reaction was done on all samples to identify virulence genes ETA, oprL, gyrB and the species 16SrDNA. Results: Of the 60 isolates of Pseudomonas aeruginosa, 38 samples (63.3%) contains gene gyrB and oprL, 37 samples (61.6%) had the gene ETA, and all had 60 isolate (100%) gene 16SrDNA. Conclusion: Considering the importance of rapid detection of this bacterium due to the incidence of resistance and presence of problems in biochemical methods, concurrent identification of multiple genes by Multiplex-PCR is a sensitive and accurative way in detecting the bacteria.