مقايسه ساختار كروماتين و PLCζ اسپرم بين مردان نابارور اليگوآستنوتراتوزواسپرمي (OAT) و بارور

A Comparison of chromatin structure and PLCζ in sperms of subfertile oligoasthenoteratozoospermic and fertile men

زمينه و هدف: مهم ترين علل عدم فعال شدن تخمك پس از تكنيك هاي كمك باروري، عدم رهايش فاكتورهاي اسپرمي فعال كننده تخمك و آسيب به DNA اسپرم است. PLCζ يكي از فاكتورهاي اسپرمي است كه در فعال شدن تخمك نقش دارد. هدف از اين مطالعه مقايسه PLCζ، كمبود پروتامين (ماركر بلوغ كروماتين اسپرم) و آسيب DNA اسپرم در 2 گروه افراد بارور و نابارور اليگوآستنوتراتوزواسپرمي است. روش بررسي: در اين مطالعه شاهد كنترل، نمونه مايع مني از 10 فرد نابارور اليگوآستنوتراتوزواسپرمي و 10 فرد بارور جمع آوري گرديد. پارامترهاي اسپرمي (غلظت، تحرك و مورفولوژي)، بيان پروتئين PLCζ، آسيب DNA و كمبود پروتامين به ترتيب بر اساس پروتكل سازمان بهداشت جهاني، فلوسايتومتري، رنگ آميزي TUNEL و كرومايسين A3 مورد بررسي قرار گرفت. يافته ها: درصد اسپرم هاي PLCζ مثبت، سلامت DNA و محتوي پروتامين در افراد نابارور اليگوآستنوتراتوزواسپرمي نسبت به افراد بارور، به طور معني داري كمتر بود؛ همچنين ارتباط معني داري بين درصد اسپرم هاي PLCζ مثبت با پارامترهاي اسپرمي و درصد كمبود پروتامين مشاهده گرديد. ارتباط معني داري نيز بين درصد آسيب DNA اسپرم و كمبود پروتامين مشاهده شد. نتيجه گيري: در اين افراد نابارور، سلامت كروماتين اسپرم و درصد اسپرم ها با PLCζ مثبت به شدت كاهش يافته است كه مي تواند يكي از دلايل عدم لقاح در اين افراد باشد؛ لذا روش فعال سازي مصنوعي تخمك براي اين نوع ناباروران پيشنهاد مي شود.

Background and aims: The most important cause of fertilization failure after assisted-reproduction techniques are lack of releasing sperm-associated oocyte activating factors (SAOAFs) and sperm DNA damage. PLCζ is one of the sperm factors that plays important role in oocyte activation. The aim of this study was to compare expression of PLCζ, protamine deficiency (maturity marker of sperm chromatin) and sperm DNA damage between fertile men and oligoasthenoteratozoospermic subfertile men. Methods: In this case-control study, semen samples were collected from 10 subfertile oligoasthenoteratozoospermic and 10 fertile men. Sperm parameters (concentration, motility, morphology), expression of PLCζ, DNA damage, and protamine deficiency were assessed by World Health Organization protocol, flow cytometery, TUNEL and chromomycin A3 staining, respectively. Results: Percentage of PLCζ- positive sperm, DNA integrity and protamine content significantly was lower in oligoasthenoteratozoospermic men compared to fertile men. In addition, significant correlations were observed between percentage of PLCζ- positive sperm with sperm parameters and percentage of protamine deficiency. A significant correlation was also observed between percentage of DNA fragmentation and protamine deficiency. Conclusion: In these infertile men, sperm chromatin integrity and percentage of PLCζ-positive sperm decreased extremely. This could be one cause of fertilization failure in these individuals. Therefore, the artificial oocyte activation is recommended for these type of infertile men.