ارزيابي توانايي رشد و تجزيه زيستي نفت سفيد توسط چندين باكتري جداسازي شده از خاك و آب آلوده به تركيبات نفتي

Evaluation of the growth ability and biodegradation of kerosene by several bacteria isolated from oil-contaminated soil and water

پژوهش حاضر جهت جداسازي و شناسايي باكتري هاي مناسب زيست پالايي تركيبات نفتي موجود در خاك و آب آلوده در منطقه بندرعباس انجام شد. سه نمونه خاك و دو نمونه آب آلوده از پالايشگاه بندرعباس جمع آوري و جدايه هايي از آن ها در دماي 37 درجه سانتي گراد جداسازي شد. با جايگزيني عناصر كربن و گوگرد در محيط كشت باكتريايي SSM با نفت سفيد (20%) قابليت رشد جدايه ها در غلظت بالاي نفت سفيد بررسي شد. شناسايي جدايه ها از طريق تست هاي بيوشيميايي، كيت شناسايي باكتري API20E و همچنين توالي يابي ژن S rDNA16 انجام شد و با استفاده از كروماتوگرافي گازي ميزان تجزيه زيستي جدايه ها بررسي شد. از نمونه هاي جمع آوري شده 9 جدايه جداسازي و در آزمون جايگزيني عناصر مختلف در محيط كشت باكتريايي SSM با نفت سفيد (20%) مشخص شد كه 4 جدايه توانايي استفاده از تركيبات گوگردار نفت را دارند. آزمون هاي شناسايي جدايه ها نشان داد كه جدايه ها Enterobacter cloacae، Enterobacter hormaechei و دو جدايه Enterobacter sakazakii بودند. كروماتوگرافي گازي تاييد كرد كه باكتري هاي Enterobacter cloacae، Enterobacter hormaechei وEnterobacter sakazakii به ترتيب 32.24، 11.98 و 44.92 درصد از نفت سفيد را به عنوان منبع گوگرد در دماي 37 درجه سانتي گراد تجزيه كرده اند. با توجه به نتايج به دست آمده مشخص شد اين باكتري ها از قابليت تجزيه زيستي خوبي برخوردار هستند و مي توان آن ها را به عنوان باكتري هايي با قابليت تجزيه زيستي تركيبات نفتي معرفي كرد.

Bioremediation is an effective approach to address inevitable spillage of oil. In this research, three soil and two wastewater samples contaminated by petroleum were collected from Bandar Abbas Refinery, Iran. These samples were used for isolation of bacteria, which can be used to clean polluted lands at 37°C. The biodegradation activity of the selected bacteria was analyzed by Gas Chromatography. The biochemical tests, 16S rDNA sequence, and API 20 E kit were utilized so as to idendify isolations. Nine strains were isolated and cultured in modified SSM medium at 37 °C. Four bacteria were selected for identification because of their high growth rate in kerosene tests. The identification tests showed that these bacteria belong to Enterobactercloacae, Enterobacterhormaechei, and two of them belong to Enterobactersakazakii that could degrade 32.24%, 11.98%, and 44.92% of 10% kerosene as sulfur source during 7 days, respectively. Hence, these bacteria had considerable potential to degrade kerosene in a short time and they can be considered as excellent candidates for petroleum biodegradation.