مقايسه تكوين جنين دو سلولي موش پس از هم كشتي با فيبروبلاست هاي جنين موش و انسان

Comparison of the Development of Two-cell Mouse Embryo after Co- Culture with Mouse and Human Embryonic Fibroblasts

مقدمه: سيستم هاي هم كشتي جنين نشان دادند سلول هاي مغذي فوايد موثري در تكامل جنين قبل از لانه گزيني دارد. در مطالعه حاضر تاثيرات هم كشتي جنين دو سلولي موش با فيبروبلاست هاي جنين موش ( MEF ) و فيبروبلاست هاي جنين انسان ( HEF ) در دوره قبل از لانه گزيني مقايسه شد. روش كار: جنين هاي دوسلولي موش كه از لوله رحم موش هاي Balb / C استخراج شده بودند به طور اتفاقي به سه گروه زير تقسيم شدند: جنين هاي گروه كنترل ) G1 ( به تنهايي و جنين هاي گروه آزمون اول ( G2 ) با فيبروبلاست هاي جنيني موش وجنين هاي گروه آزمون دوم ( G3 ) با فيبروبلاست هاي جنيني انسان هم كشتي شدند. همه جنين ها در محيط كشت MEM- α و در شرايط استاندارد انكوباتور زير پارافين مايع كشت شدند و ارزيابي جنين ها تا مرحله خروج از رونا پلوسيدا ( hatching stage ) انجام شد و نتايج با آزمون هاي آماري Mann-Whitney و T-Test آناليز شد و در همه آزمون ها 0/05 ≤ P حد معني داري در نظر گرفته شد. يافته ها: نتايج نشان داد ميزان بلاستولاسيون و خروج از زونا پلوسيدا در جنين هاي گروه G2 به طور معني داري نسبت به گروه كنترل افزايش يافت. ولي جنين هايي كه در گروه G3 كشت شده بودن اختلاف معني داري با گروه كنترل نشان ندادند به نظر مي رسد فيبروبلاست هاي جنين موش با حذف استرس اكسيداتيو و تنظيم متابوليسم سلولي، جنين هاي دو سلولي موش را در برابر شرايط نامساعد ازمايشگاه محافظت مي كند. نتيجه گيري: تكامل جنين دو سلولي موش با استفاه از تك لايه فيبروبلاستي جنيني موش در سيستم هم كشتي و در محيط آزمايشگاه نسبت به فيبروبلاست هاي جنيني انسان بهتر است.

Introduction: Co-culture systems showed that feeder cells have positive effects on the development of fetus before implantation. In the present study, the effects of mouse embryonic fibroblasts (MEF) and human embryonic fibroblast (HEF) co-culture on twocell mouse embryos in the early developmental stage were compared. Methods: Two-cell mouse embryos extracted from the Balb/C mice uterine tubes were divided randomly to three groups as follow: the control group (G1) that cultured alone, the first experimental group (G2 group) that co-cultured with HEF, and the second experimental group (G3 group) that co-cultured with MEF. Also, the embryos in all groups cultured in the same culture medium (MEM-α (under the standard conditions such as incubation under liquid paraffin and daily evaluation for hatching stage. Then, data were analyzed by the Mann-Whitney and Student t test (P < 0.05). Results: The results of the current study showed that the development of embryos in terms of blastulation and hatching rate was significantly increased in the G2 group than the control group (P < 0.05). Also, the blastomere in G2 group had higher quality than the other groups. It seems that fibroblasts could protect embryos against deleterious agents through oxidative stress deletion and cell metabolism regulation. Conclusions: The current in vitro study showed that the monolayer of MEF is better than that of HEF to develop two-cell mouse embryos.