Rapid and accurate diagnosis of Foot-and-mouth disease virus by Real-time PCR in field samples

طي سالهاي 1390-1389، از روش PCR Real-time براي رديابي RNA ويروس تب برفكي در 147 نمونه اپيتليوم از دام‌هاي مشكوك به بيماري تب برفكي كه از كانون‌هاي مختلف اخذ گرديده بود استفاده شد. قطعه 3D ژن ويروس تب برفكي به عنوان ناحيه ژنومي حفاظت شده در سروتيپهاي ويروس توسط PCR Real-time مورد آزمايش قرار گرفت. رد يابي ويروس تب برفكي در روش PCR Real-time حساسيت بيشتري نسبت به روش RT-PCR معمولي و ساير روش‌هاي تشخيصي روتين دارد. براي ارزيابي حساسيت اين روش از رقت‌هاي لگاريتمي RNA ويروس تب برفكي(Asia) استفاده شد كه با رقت سازي 10-log RNA ويروس تب برفكي سويه Asia مقدار 101.2 TCID50/ml بدست آمد. براي ارزيابي اختصاصيت جفت پرايمر مربوط به قطعه 3D ژن ويروس تب برفكي و همچنين پروب مربوطه از دو ايزوله ويروس زبان آبي(blue-tongue) و ويروس وزيكولار خوك (Swine vesicular disease virus) استفاده شد. در نهايت نتايج نشان داد كه به نظر مي‌رسدPCR Real-time يك ابزار قوي و مناسب تشخيصي بوده كه مي‌توان در كنار ديگر روشهاي روتين تشخيصي ويروس تب برفكي بكار گرفته شود.

During 2010-2011, Real-time PCR procedure was used to detecting FMDV RNA on 147 epithelium samples from the field. In this survey, for Real-time PCR from 3D gene segment as conserve region selected for tracking all of seven serotypes FMDV. The assay detected the viral RNA in all serotypes of FMDV. The rRT-PCR specifically detected FMD virus in sample with greater sensitivity than our conventional RT-PCR procedure and our routine diagnostic procedures. Sensitivity of this technique was estimated by 10-log serials dilution Asia virus RNA that defined 101.2 TCID50/ml. Also, to assess the specificity of primer pairs related to 3D segment and specific probe was used Swine vesicular disease virus (SVDV) and bluetongue virus (BTV) isolates RNA. The results showed that rRT-PCR is seen as a powerful and valuable tool concomitant with routine diagnostic methods for FMD virus diagnosis.