Progress and improvement of the manufacturing process of snake antivenom

پادزهر بيش از يك قرن است كه بطور موفقيت آميزي در درمان مارگزيدگي مورد استفاده قرار گرفته است و درحال حاضر نيز تنها درمان موثر برعليه مارگزيدگي بشمار مي‌رود. توليد پادزهر از سال 1894 كه اولين بار توسط Calmette تهيه شد، شروع گرديده است . در حال حاضر روش رايج مورد استفاده در توليد پادزهر توسط اكثر توليدكننده‌ها از روش معرفي شده توسط Pope در سال 1938 ميلادي منشا گرفته است. در طول ساليان گذشته با بكارگيري روش‌هاي نوين براي تهيه IgG ، F(ab) و F(abʹ)2 سعي در ارتقا كيفيت پادزهر شده است. روش‌هاي نوين مذكور شامل تغييرات كامل يا نسبي در بخش‌هاي مختلف فرآيند توليد شامل حيوانات مورد استفاده، پروتكل ايمن سازي، بكارگيري ياور‌هاي جديد ( ميكروانكپسولاسيون و ... در ايمن سازي ، تصفيه و تخليص) استفاده از كاپريليك اسيد، كروماتوگرافي، ديافيلتراسيون و اولترافيلتراسيون، هضم آنزيماتيك IgG (پاپايين و پپسين) و تخليص و فراكسيونه كردن سم‌ها بوده است. با هضم آنزيمي IgG بسته به نوع آنزيم مورد استفاده قطعات مختلف ايجاد مي‌گردند. بدين ترتيب پاپايين منجر به ايجاد يك قطعه كريستاليزه شونده Fc و دو قطعه داراي قابليت واكنش با آنتي ژن F(ab) مي‌شود و پپسين منجر به يك قطعه F(abʹ)2 واكنش دهنده با آنتي ژن شده و Fc هضم مي‌گردد. F(abʹ)2 و F(ab) خاص از فرآيند هضم توانايي واكنش با آنتي ژن و خنثي سازي آن را حفظ مي‌نمايند.

Antivenoms have been used successfully for more than a century and up to now constitute the only effective treatment for snakebites .The production of antivenin started long time ago when the calmette was prepared the antivenom in 1894.The method currently used to prepare antivenom by most of the manufacturers are originated from the method of Pope which was develop in 1938. Several new approaches in the production of antivenom have been proposed to produce IgG, F(ab)2, F(ab) antivenin to improve their quality .These improvement include complete or partial modification in the antivenom production regarding animal, immunization protocols , new adjuvants in hyperimmunization of animals , purification processes ( caprylic acid ,chromatography , diafiltration and ulterafiltration ),enzymatic digestion of IgG (pepsin, papain ) and fractionation of venom .When the IgG is digested enzymatically, different fragments are obtained depending on the enzyme used, that is, if papain is used, three fragments are obtained, the crystallizing fragment (Fc) and two antigen-binding fragments F(ab) and, if pepsin is used, one F(abʹ)2 fragment is obtained, while the crystallizing fragment is digested. Fab and F(ab)2 fragments conserve their capacity to specifically bind to the antigen that gave rise to them.