بررسي مولكولي بتالاكتامازهاي وسيع الطيف در گونه هاي E.COli جدا شده از نمونه هاي باليني در شهر اصفهان

گونه های اشریشیا كلی مهمترین عامل عفونت های مجاری ادراری (UTI) می باشند. این باكتری ها امروزه به انواع زیادی از آنتی بیوتیك ها از جمله بتالاكتام ها مقاوم می باشند، كه مكانیسم اصلی مقاومت در آن ها تولید بتالاكتاماز می باشد. این باكتریها ، بتالاكتامازهایی را تولید می كنند كه توسط پلاسمید كد می شوند، و از مهمترین آنها می توان blaoxablatem به blactx-miv blashv را نام برد. این آنزیم ها كه با نام بتالاكتامازهای وسیع الطیف (Extended Spectrum beta lactamase) معروفند قادر به تخریب سفالوسپورین های با طیف اثر وسیع مانند سفوتاكسیم، سفتریاكسون وسفتازیدیم می باشند. در این بررسی سعی شد تا بتالاكتامازهای وسیع الطیف در گونه های E.coli جدا شده از موارد بالینی در كودكان زیر ۱۰ سال از نظر مولكولی مورد بررسی قرار گیرند. در این مطالعه ۱۴۵ نمونه ادرار كه كشت آنها از نظر وجود اشریشیا كلی مثبت بود جمع آوری و با تست های رایج میكروب شناسی و بیوشیمیایی تایید شدند. سپس آنتی بیوگرام بروش دیسك دیفیوژن انجام و جهت تایید ESBL بودن آنها از روش Combined disk method با استفاده از دیسك های تركیبی حاوی سفوتاكسیم- كلاولاتیك اسید و سفتازیدیم - كلاو لاتیك اسید اسنفاده گردید و نهایتا سویه هایی كه از نظر فنوتیپی مولد ESBL بودند توسط روش Multiplex PCR از نظر وجود ژن های blaoxa , blatem , blactx-miv, blashv مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج نشان داد كه از ۱۴۵ گونه اشریشا كلی تعداد ۵۱ ایزوله (2/35 ٪ ) دارای مقاومت به سفتازیدیم، تعداد ۶۱ ایزوله ( 1/42 ٪) دارای مقاومت به سفوتاكسیم و تعداد ۵۹ ایزوله ESBL مثبت بودند. از میان این ۵۹ ایزوله ESBL مثبت، تعداد ۲۲ ایزوله (3/37 ٪) دارای ژن blactx-miv ، تعداد ۴۲ ایزوله (2/71 ٪) دارای ژن blatem ، تعداد ۷ ایزوله (9/11 ٪) دارای ژن blashv و تعداد ۲۳ ایزوله (۴۰٪ ) دارای ژن blaOXA بودند.

Escherichia coli is the most common cause of bacterial infections. Antibiotics used to treatment of these infections called beta-lactamase. The main mechanism of bacterial resistance to beta-lactam antibiotics, is production of beta-lactamase that before antibiotics reach the PBPs on the cytoplasmic membrane, hydrolyze and inactivate them. This bacterial family, produce the beta-lactamase including the CTXM, SHV and TEM that coded by plasmid. These enzymes, called ESBLs (Extended Spectrum Beta Lactamases), that able to destruction of broad-spectrum cephalosporins such as cefotaxime, ceftriaxone and ceftazidime . In this study,145 urine samples that were positive for E.coli were chosen and confirmed by biochemical tests. Then antibiotic susceptibility was determined by disc diffusion method. To confirm the ESBL-positive strains were used Combined Disc Method that using hybrid discs containing cefotaxime - clavulanic acid and ceftazidime - clavulanic acid. The ESBL positive phenotype isolates were studied by the PCR method and isolates with blaCTX-M-IV, blaOXA, blaTEM, blaSHV genes were identified.Totaly 145 strains of E. coli, 51 isolates (35/2%) were resistance to ceftazidime and 61 isolates (%42/1) were resistance to cefotaxime and 59 isolates (%40/7) were ESBL positive. 22 (%37/3 ) of the isolates have blaCTX-M, 42 (%71/2) have blaTEM, 7 (%11/9) have blaSHV and 23 (%40) have blaOXA .Based on the comparison of our results with other studies, the prevalence of beta-lactamase genes and their derivatives are identified and need to replace the appropriate antibiotics is essential.