توليد بيوسورفكتانت از باكتري سودوموناس آئروژينوزا براي پاكسازي خاك آلوده به نفت خام

Biosurfactant production using pseudomonas aeruginosa bacteria to clean up the soil contamination with crude oil

خاك يكي از منابع اساسي و بخش مهمي از منابع تجديدپذير طبيعي به همراه آب و پوشش گياهي مي باشد . آلودگي آن باعث ايجاد چالش هاي بسياري براي انسان ها و ديگر موجودات زنده مي شود، لذا پاكسازي خاك آلوده بسيار حائز اهميت است . امروزه آلودگي نفتي خاك از مهمترين مسائل زيست محيطي در جهان مي باشد. توليد بيوسورفكتانت رامنوليپيد از باكتري سودوموناس آئروژينوزا 9027ATCC براي حذف نفت خام از خاك آلوده شده از اصلي ترين دستاوردهاي اين پژوهش است. تركيبات محيط كشت اصلي باكتري سودوموناس شامل MgSO4.7H2O، KCl ، NaNO3 ،Na2HPO4 و NaH2PO4 به همراه روغن آفتاب گردان بعنوان منبع كربن مورد استفاده قرار گرفت . تركيبات ريزمغذي اين باكتري trisodium citrate.2H2O ،FeCl3.6H2O ، ZnSO4.7H2O ،CoCl2.6H2O ،CuSO4.5H2O و MnSO4.H2O مي باشد.محيط كشت باكتري را به مدت 7 روز در دماي 37 درجه با rpm 150 درون شيكر انكوباتور قرار مي دهيم ، سپس با 2 مرحله استخراج توسط نرمال هگزان و اتيل استات بيوسورفكتانت رامنوليپيد توليد مي شود. دونوع رامنوليپيد RL1 و RL3 توسط اين ميكروارگانيسم با انجام آناليز TLC و FTIR مورد تاييد قرار گرفته است. نتايج نشان مي دهد كه رامنوليپيد توليدي از استاندارد هاي لازم برخوردار است و در غلظت CMC كيفيت بسيار خوبي در كاهش كشش سطحي بين خاك و نفت را داراست و مي تواند حدود 80 درصد نفت خام را از خاك حذف كند. بيوسورفكتانت ها با ساختارهاي متنوع، سميت پايين و زيست تخريب پذيري بالا جايگاه خوبي در صنايع مختلف دارند.

Soil is the basic source of environment and important part of the renewable natural resources along with water and the vegetation. contaminated soil will cause many challenges for humans and other organisms, so the crude oil removal from soil is very important. Nowadays contamination soil with oil is the most environmental issues in the world. Rhamnolipid biosurfactant production from the pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 for crude oil removal of contaminated soil is the main achievement in this project. The basic composition of pseudomonas aeruginosa medium consists of MgSO4.7H2O, KCl, NaNO3, Na2HPO4, Na2HPO4 and sunflower as the carbon source were used. The trace elements composition of this bacteria is trisodium citrate.2H2O, FeCl3.6H2O, ZnSO4.7H2O, CoCl2.6H2O, CuSO4.5H2O and MnSO4.H2O.In continue we put the bacteria medium in incubator shaker for 7 days in 37̊C and 150 rpm. The rhamnolipid biosurfactant is produced after 2 times extraction with n-Hexane and Ethyl acetate .2 kinds of rhamnolipid in this microorganism are RL1 and RL2 that were confirmed with TLC and FTIR analysis. It has been shown that the producing rhamnolipid had a good quality for reducing surface tension among soil and oil in CMC concentration and could remove 80% of crude oil from soil. biosurfactant with diverse structures, low toxicity and high biodegradation could be useful in different industries.