توليد آنتي بادي پلي كلونال عليه ويروس تريستزاي مركبات با استفاده از فناوري پروتئين نوتركيب

ويروس تزيستزا يكي از مخرب ترين ويروس هاي مركبات مي باشدكه هر ساله خسارات فراواني رادر سراسر جهان به محصول مركبات واردمي كند. براي تشخيص اين ويروس در نمونه هاي گياهي و اطمينان از در اختيار گذاشتن نهاده هاي سالم براي كشاورزان از روش الايزااستفاده مي شود كه در اين روش نياز به استفاده از آنتي بادي عليه پروتئين سطحي ويروس است. جهت تهيه انواع كيت هاي تشخيصي بيماري توليد آنتي بادي پلي كلونال ضروري به نظر مي رسد و توليد داخلي آن مي تواند كمك بزرگي به كاهش هزينه هاي تشخيص و جلوگيري از شيوع اين بيماري در باغات مركبات كشور باشد. در اين تحقيق ابتدا ژن پروتئين سطحي ويروس از نمونه هاي آلوده جداسازي و سپس اين ژن دروكتور بياني pET28 a(+) كلون شد و اين وكتور بياني حاوي ژن مورد نظر وارد باكتري Ecoli سويه ي BL21 گرديد و پروتئين سطحي ويروس تريستزادراين باكتري بيان شد. اين پروتئين كه داراي نشان هيستيدين مي باشد با استفاده از كروماتوگرافي تخليص شد، پروتئين خالص شده به خرگوش تزريق گرديد و آنتي بادي عليه اين پروتئين در خون خرگوش توليد شد. درمرحله ي آخر هم براي بررسي حساسيت و اختصاصي بودن آنتي بادي توليد شده از روش الايزا، وسترن بلات و ديبا استفاده شد كه نتايج بدست آمده نشان از كيفيت خوب آنتي بادي توليد شده دارد.