بهينه سازي عوامل دخيل در انتقال ژن به واريته بذر زرد كتان ايراني

كتان L.Linum usitatisimum حاوي مقادير قابل توجهي از ايدهاي چرب غير اشباع،پروتئين،فيبر و تركيبات متنوع قابل استخراج است.رشد فزاينده جمعيت جهان و افزايش تقاضا در دهه هاي اخير موجب شده است تا تلاش گسترده اي در جهت افزايش كمي و كيفي كتان انجام گيرد.اين در حالي است كه كتان در ايران تنها به صورت محدود در صنايع دارويي و يا صنعتي استفاده مي شود.بر همين اساس و در راستاي رفع نيازهاي صنايع مرتبط با اين گياه ارائه يك دستورالعمل جامع جهت بهبود كمي و كيفي از طريق انتقال ژن و واريته هاي رايج ضروري به نظر مي رسد.در تحقيق حاضر،عوامل دخيل در انتقال ژن به روش ريز پرتابي در واريته بذر زرد كتان مورد بررسي قرار گرفت،در اين تحقيق جهت تراريختي به طريقه ريزپرتابي تاثير ريز نمونه، طول دوره پيش كشت و فواصل ريز نمونه ها از ديسك پاره شونده در اطاقك تفنگ ژني مطالعه و بهينه سازي شد. جهت بررسي حضور و فعاليت سازه پلاسميدي در سلولهاي شليك شده از آزمون هيستوشيميايي gus استفاده شد.نتايج بدست آمده از مطالعات مربوط به انتقال ژن گزارشگر gus نشان دهنده بيشترين ميزان بيان موقت اين ژن در ريز نمونه هاي هيپوكوتيل با طول دوره پيش كشت 8 روزه بود.قرار دادن ريز نمونه ها در تركيب فواصل 2 سانتيمتري ديسك پاره شونده از بزرگ حامل و 9 سانتيمتري توري نگهدارنده از نمونه هدف در اطاقك شليك تحت فشار منفي 1100psi و با استفاده از dna پلاسميدي خالص سازي شده به روش فنل - كلروفرم - ايزوآميل الكل بيشترين سيگنال هاي ورود ژن به ريز نمونه هاي گياهي را توليد نمود.