مقايسه محيط‌هاي مختلف براي ذخيره‌سازي جدايه‌هاي متانوتروفي

Comparison of different culture media for storage of methanotrophic isolates

دانش ما در مورد نگهداري بلند مدت ميكروارگانيسم‌هاي محيطي محدود است و با وجود اهميت آن براي تنوع زيستي ميكروبي و بكارگيري در نوآوري‌هاي بيوتكنولوژيكي، نياز به تحقيقات بيشتر در اين زمينه است. نگهداري بلند مدت ارگانيسم‌هايي مانند باكتري‌هاي متانوتروف مشكل است و محققين توانسته‌اند برخي از متانوتروف‌ها را براي دوره‌هاي كوتاه مدت در شرايط انجماد نگهداري كنند. هدف از اين مطالعه، ارزيابي و مقايسه محيط‌هاي مختلف براي نگهداري متانوتروف‌هاي جداشده از خاك بندرعباس مي‌باشد. از دو محيط معدني حاوي نمك‌هاي نيترات پتاسيم و كلريد آمونيوم به همراه 20% گليسرول بصورت مايع و جامد، و نيز دو محيط كشت تريپتيك سوي براث حاوي 20% گليسرول و تريپتيك سوي براث حاوي 20% گليسرول و ساكاروز استفاده‌شد. سوسپانسيون باكتريايي در دو دماي 16- و 20- درجه سانتي‌گراد قرار داده‌شد. همچنين از محيط‌هاي معدني بدون گليسرول نيز براي نگهداري سوسپانسيون باكتريايي در دماي يخچال و دماي محيط استفاده‌شد. پس از سه ماه نگهداري سوسپانسيون باكتريايي در دماي 16- و 20- درجه سانتي‌گراد، بجز دو جدايه‌ي متانوتروفي، تمامي جدايه‌هاي متانوتروفي در محيط‌هاي تريپتيك سوي براث قابليت كشت داشتند. جدايه‌ها، ماندگاري بهتري در محيط تريپتيك سوي براث حاوي 20% گليسرول و ساكاروز و در دماي 20- درجه سانتيگراد از خود نشان دادند. باتوجه به نوع ميكروارگانيسم، براي نگهداري ميكروارگانيسم‌ها در ميان مدت و دراز مدت، روش‌ها و محيط‌هاي كشت مختلف بايد ارزيابي شود.

Our knowledge about the long-term preservation of environmental microorganisms is limited. this area requires more extensive research due to its crucial role in maintaining microbial biodiversity and advancing biotechnological innovations. Long-term preservation of organisms such as methanotrophic bacteria is challenging, and researchers have managed to preserve some methanotrophs for short periods under freezing conditions. The aim of this study was to evaluate and compare different media for storage of methanotrophs, which were isolated from Bandar Abbas soil. Two mineral media containing potassium nitrate and ammonium chloride salts, along with 20% glycerol in both liquid and solid forms, and two Tryptic Soy Broth media, one containing 20% glycerol and the other containing 20% glycerol and sucrose, were used. These media were stored at -16°C and -20°C. Additionally, mineral medium without glycerol were used to store bacterial suspensions. After three months of storing at -16°C and -20°C, all methanotroph isolates except two were culturable in Tryptic Soy Broth media. The isolates showed better viability in Tryptic Soy Broth medium containing 20% glycerol and sucrose at -20°C. Considering the diversity of microorganisms, it is essential to evaluate various methods and media for their preservation for medium term and long time.