طراحي و توسعه ايمونوسنسور جهت تشخيص كانديدا آلبيكنس با استفاده از تراشه ميكروفلويديك

Design and development of immunosensor to diagnosis Candida albicans using microfluidic chip

كانديدا آلبيكنس يكي از علل اصلي مرگ‌و‌مير بيماران بستري در بيمارستان‌ها مي‌باشد. هدف از انجام اين تحقيق، ارائه يك روش سريع و كارآمد جهت تشخيص به موقع بيماران مبتلا به كانديديازيس است. در اين مطالعه، 200 نمونه از افراد سالم و بيمار جمع‌آوري شد و گونه‌هاي كانديدا با تكنيك‌هاي مورفولوژيك و شيميايي شناسايي شدند. داده‌ها با استفاده از آزمون آماري Chi- square مورد تجزيه و تحليل آماري قرار گرفتند. تراشه ميكروفلوييديك مورد نظر به روش فتوليتوگرافي ساخته شد. اين تراشه از PDMS ساخته شده است. سطح PDMS با استفاده از لينكر GPTMS براي تثبيت آنتي بادي اوليه، اصلاح شد. سپس به ترتيب آنتي بادي پلي كلونال اوليه و مخمر كانديدا آلبيكنس داخل چيپ ميكروفلوييديك تثبيت شدند. كانديدا آلبيكنس توسط آنتي‌بادي پلي‌كلونال ثانويه كونژوگه با FITC كه ساختار ساندويچي ايجاد مي‌كند آشكارسازي شد. باتوجه به نتايج حاصل از نمونه‌برداري و تشخيص، كانديدا آلبيكنس 58 درصد سويه هاي جداسازي شده را به خود اختصاص داده است. نتايج اين مطالعه نشان مي‌دهد كه عفونت قارچي در افراد با زمينه‌هاي مستعد كننده، به ويژه در افراد مبتلا به ايدز، ديابت، سرطان و مشكلات گوارشي، شيوع قابل توجهي دارد. در ادامه، روش‌هاي آزمايشگاهي معمول با روش تشخيصي چيپ مقايسه شد. و به طور كلي با طراحي و ساخت يك بيوسنسور دقيق، كانديدا آلبيكنس را در مدت زمان 2 ساعت با حداقل غلظت تشخيص درCFU/mL 10 تشخيص داده شد.

Candida albicans is one of the main causes of death in hospitalized patients. The purpose of this research is to develop a fast and efficient approach for the timely diagnosis of patients suffering from candidiasis. In this study, 200 samples were collected from both healthy individuals and those who were sick, and Candida species were then identified using morphological and biochemical techniques. The data were statistically analyzed using the chi-square test. The target microfluidic chip was fabricated using the photolithography method. The chip was made of PDMS. The PDMS surface was modified by using a GPTMS linker to immobilize the primary antibody against C. albicans. The chip detected C. albicans by using a sandwich immunoassay with a secondary antibody conjugated with FITC. The study found that C. albicans was the most prevalent species (58%). The study also found that Candida infection was more common among women, young adults, elderly people, and patients with gastrointestinal diseases. The study also found that the microfluidic chip was able to detect C. albicans in clinical samples in a period of 2 hours with a low detection limit of 10 CFU/mL.