ارزيابي فعاليت ضد ميكربي باكتري هاي پروبيوتيك بومي برعليه برخي پاتوژن هاي آبزيان

In Vitro evaluation of antimicrobial activity of native probiotic bacteria against some common aquatic pathogens

پروبيوتيك‌ها ميكروارگانيسم‌هاي زنده‌اي هستند كه وقتي به مقدار كافي مصرف شوند، براي ميزبان مفيد هستند. اين ارگانيسم ها معمولاً طيف وسيعي از مواد ضد ميكروبي توليد مي كنند كه پاتوژن هاي ميكروبي را مهار و كنترل مي كند. مطالعه پيش رو به منظور بررسي فعاليت ضد ميكروبي باكتري هاي پروبيوتيك بومي جدا شده از ماهيان خليج فارس انجام شد. در مجموع 83 ايزوله گرم مثبت از روده و ركتوم ميگو، خرچنگ، ماهي كفشك، ماهي زبون، ماهي زمين كن، و ماهي شوم صيد شده از خليج فارس جداسازي شد. اين سويه‌ها در ابتدا با روش‌هاي فنوتيپي گروه بندي شده و بر اساس استاندارد ملي ايران به شماره 19459 از نظر ويژگي هاي پروبيوتيكي مورد ارزيابي قرار گرفتند. از بين همه جدايه‌هاي مورد بررسي، تنها 33 ايزوله تمام معيارها را پاس كردند و به عنوان كانديدهاي پروبيوتيك معرفي شدند كه شناسايي آنها با استفاده از تعيين توالي ژن 16S rRNA صورت گرفت. فعاليت ضد ميكروبي سويه‌هاي منتخب عليه پاتوژن‌هاي آبزيان شامل Lactococcus garvieae (IBRC-M 11508)، Yersinia ruckeri (IBRC-M 11507) و (Streptococcus iniae (IBRC-M 11513 بر اساس روش استاندارد چاهك پليت روي محيط كشت مولر هينتون آگار انجام شد. در ابتدا سوسپانسيون عاري از باكتري (CFS) پروبيوتيك ها با استفاده از سانتريفيوژ مايع فرمنتاسيون و بعد از آن از طريق فيلتراسيون با فيلترهاي سلولزي به دست آمد. در مرحله بعد سوسپانسيون عاري از باكتري با دستگاه خشك كن تحت خلاء خشك شد و مراحل بعدي كار روي اين نمونه ها صورت گرفت. در نهايت دو سويه پروبيوتيك با نام هاي D.Ash I و LP7(18)، كارايي قابل توجهي را در برابر پاتوژن ها از خود نشان دادند كه به ترتيب به عنوان Levilactobacillus brevis و Pediococcus acidilactici شناسايي شدند. مطالعات براي ارزيابي اثرات سويه هاي منتخب در بهبود علائم بيماري در مزرعه پرورش ماهي ادامه دارد.

Probiotics are live microorganisms, which when administered in adequate amounts, confer a health benefit on the host. Probiotics typically produce a wide range of antimicrobial substances that inhibit and control microbial pathogens. This study was conducted to evaluate antimicrobial activity of our native probiotic bacteria isolated from Persian Gulf fish. A total of 83 Gram-positive isolates have been cultured from intestine and rectum of shrimp, crab, sole fish, flounder fish, goby fish and eel fish. These strains were initially characterized by phenotypic methods and survey for probiotic activity according to Iran National standard No. 19459. Among all, only 33 isolates passed all criteria and introduced as probiotic candidates which characterized by 16S rRNA gene sequencing. Antimicrobial activity of selected strains against fish pathogens include Lactococcus garvieae (IBRC-M 11508), Yersinia ruckeri (IBRC-M 11507) and Streptococcus iniae (IBRC-M 11513) was carried out according to well diffusion method on Muller-Hinton agar. At first, cell-free supernatant of strains (CFS) were obtained by centrifugation of liquid probiotic culture and filtered through cellulose nitrate filter of 0.45 µm. The CFS was then freeze-dried and used as source for antimicrobial compounds in the process. As a result, two probiotic strains by the name of Dash I (5) and LP7 (18) demonstrated significant efficacy against pathogens which characterized as Levilactobacillus brevis and Pediococcus acidilactici, respectively. Studies to evaluate the effects of these selected strains in amelioration disease symptoms in fish farm is ongoing.