پديدآورندگان :
خطيبي فاطمه گروه زيست‌فناوري، دانشكده علوم و فناوري نوين، دانشگاه سمنان، سمنان، ايران , ابوالمعالي شمس‌الضحي s_ abolmaali@semnan.ac.ir گروه زيستشناسي، دانشكده علوم پايه، دانشگاه سمنان، سمنان، ايران , گلستاني‌نسب مهدي گروه زيستشناسي، دانشكده علوم پايه، دانشگاه سمنان، سمنان، ايران , درويش‌عليپور آستانه شكيبا گروه زيست‌فناوري، دانشكده علوم و فناوري نوين، دانشگاه سمنان، سمنان، ايران
چكيده فارسي :
پروبيوتيك‌ها، ميكروارگانيسمهاي زندهاي با اثرات مفيد بر سلامت انسان، مولكولهايزيستي با خاصيت ضدميكروبي نيز توليد ميكنند. در اين پژوهش هفت خرخاكي (Oniscidea) از مهديشهر جمعآوري و بلافاصله به آزمايشگاه زيستشناسي منتقل، روده‌ها جداسازي و در سرم فيزيولوژي همگن شدند. پس از تهيه سري رقت‌هاي1:3 تا 1:3000، 100ميكروليتر از رقت‌هاي1:96 و 1:300 در محيط نوترينت آگار تلقيح و در 37 درجه سلسيوس 18 ساعت گرماگذاري شدند. در مجموع 20 جدايه خالص بدست آمد. ريخت‌شناسي كلنيها، مشخصات ميكروسكوپي جدايه‌ها، همچنين خصوصيات بيوشيميايي آنها در دارا بودن آنزيم كاتالاز، اكسيداز و حركت بررسي گرديد. از20 جدايه با شناسه DDBCC ، 12جدايه گرم منفي و 8 جدايه گرم مثبت بودند. ازبين 13 جدايه، 5 جدايه متحرك بودند. هم چنين از بين 6 جدايه، 4 جدايه كاتالاز ضعيف و 2 جدايه كاتالاز مثبت بودند. در آزمون اكسيداز 3 جدايه اكسيداز مثبت و 3 جدايه اكسيداز منفي بودند. براي تعيين ويژگي‌هاي پروبيوتيك جدايه‌ها، وجود آنزيم هموليزين، ژلاتيناز، مقاومت به شرايط اسيدي و نمك صفراوي بررسي شد. در بلادآگارحاوي 5 درصد خون انسان، 8 جدايه هموليز گاما، 2 جدايه هموليز بتا و يك جدايه هموليز آلفا روي هموگلوبين خون انجام دادند. هر 8 جدايه با هموليز گاما فاقد ژلاتيناز بودند. براي دو جدايه با نتايج هموليز گاما و ژلاتيناز منفي، بررسي مقاومت به شرايط اسيدي و 3/0و6/0درصد نمك صفراوي انجام شد. نتايج نشاندهنده مقاومت هردو جدايه نسبت به شرايط اسيدي و نمك صفراوي بود. خاصيت ضدميكروبي جدايه‌ها با آزمون انتشار در آگار و شناسايي ماهيت بيوشيميايي و پايداري تركيب توليدي جدايه‌ها دردست بررسي است.
چكيده لاتين :
Probiotics are microorganisms that have beneficial effects on human health. They produce bio-molecules with antimicrobial properties. In this study, seven Oniscidea were collected from the mountainous around Mahdishahr (Semnan, Iran). The samples were immediately taken to the laboratory. The intestines were removed, and homogenized in physiological serum. A serial dilution of 1:3 to 1:3000 was prepared. The nutrient agar medium was inoculated with 100µl of 1:96 And 1:300, followed by incubation at 37 °C for 18 hours. Twenty isolates were purified and their morphology, microscopic characteristics using gram staining, and biochemical characteristics such as catalase, oxidase, and motility were studied. Out of 20 isolates, 12 isolates (ID; DDBCC) were gram-negative and 8 isolates were gram-positive. Motility were detected in 5 isolates. Four isolates showed weak catalase activity, while two isolates were positive catalase. Additionally, 3 isolates were positive oxidase, while 3 others were negative. Probiotic properties of the isolates were surveyed by hemolysis, gelatinase, resistance to acidic conditions, and bile salts tests. On 5% human blood agar, 8 isolates exhibited gamma hemolysis, 2 isolates showed beta hemolysis, and one isolate did alpha hemolysis. None of the isolates exhibited gelatinase activity. Moreover, two isolates that previously demonstrated gamma hemolysis and negative gelatinase, were tested for their resistance to acidic conditions and bile salt at concentrations of 0.3% and 0.6%. The results indicated that two isolates are resistant to acidic conditions and bile salt.
