بررسي اثر القايي cAMP بر سيستم اتوفاژي در رده سلولي HepG2 تيمار شده با كاتارانتين با ارزيابي فاكتور Beclin1

Evaluation of cAMP induction effect on the autophagy systems in catharanthine-treated HepG2 cell by evaluating Beclin1

تومور‌‌ها يكي از مهمترين تهديدات زندگي انسان در دنياست و بهبود دارو‌هاي مورد استفاده در درمان آن‌‌‌‌ها هميشه مورد نياز بوده است. بيشتر آلكالوئيدها علاوه بر خواص آنتي اكسيداني، فسفودي استراز را مهار كرده و cAMP داخل سلولي را افزايش مي دهند. كاتارانتين، يك آلكالوئيد ايندول متعلق به خانواده آلكالوئيدهاي وينكا، كه به طور طبيعي در بسياري از گياهان وجود دارد و همچنين به طور صناعي توسط روش هاي مختلفي سنتز ميشود، در تركيب با وينبلاستين به عنوان يك داروي ضد سرطان استفاده مي شود. هدف اصلي پژوهش بررسي اثر القايي cAMP بر سيستم اتوفاژي در رده سلولي HepG2 تيمار شده با كاتارانتين با ارزيابي‌‌فاكتور‌‌‌ Beclin1 مي‌‌باشد. . غلظت بهينه كاتارانتين (IC50) با استفاده از MTT و تعيين درصد بقا تخمين زده شد، سپس غلظت بالاتر و غلظت كمتر IC50 براي تيمارهاي بعدي در نظر گرفته شد. اثر كاتارانتين بر روي آپوپتوز توسط فلوسايتومتري و اتوفاژي با تخمين سطوح بيان ژن‌هاي مربوط به اتوفاژي با استفاده از تكنيك Real-time PCR ارزيابي شد. IC50 به دست آمده معادل 135 ميكرومولار كاتارانتين بود. نتايج نشان مي‌دهد كه كاتارانتين مي‌تواند آپوپتوز را القا كند و درمان با افزايش دوز كاتارانتين بقاي سلول‌هاي HepG2 را در يك مدل وابسته به دوز كاهش مي‌دهد. همچنين كاتارانتين، سطح بيان ژن‌هاي مرتبط با اتوفاژيBeclin1 را افزايش داد. مي توان نتيجه گرفت كه كاتارانتين علاوه بر سميت سلولي و تحريك آپوپتوز در سلول هاي HepG2، مسيرهاي سيگنال دهي اتوفاژي را در سلول هاي سرطاني افزايش داده و باعث نكروز اتوفاژيك مي شود. كاتارانتين مي‌‌تواند همراه دارو‌هاي ضدسرطان، مكمل دارويي خوبي ‌‌براي بيماران مبتلا به سرطان كبد باشد، هرچند از بابت اثرات جانبي‌‌روي ساير اعضا، نياز به مطالعه حيواني دارد. خاصيت ضدسرطاني و موثر بودن كاتارانتين نيازمند تحقيقات بيشتر در مطالعات بيوشيمي‌‌‌‌ و پزشكي است.