طراحي و ساخت سازه مولكولي براي خاموشي همزمان ژن هاي BnSHP در كلزا بر پايه miRNA

Designing a molecular construct for simultaneous silencing of BnSHP genes in oil seed rape based on miRNA

خاموشی ژن نقش حیاتی در بیان، محافظت و وراثت پذیری ژنوم موجودات پرسلولی ایفا می نماید. امروزه طراحی و سنتز سازه هایی بر پایه SiRNA و miRNA در حال رشد و توسعه بوده و منجر به تولید تكنولوژی سنتز سازه های دوگانه RNA (Bifunctional RNA) كه تلفیقی از SiRNA و miRNA می باشد گشته شده است. كلزا یكی از گیاهان مهم روغنی در كشور است. یكی از عمده ترین مشكلات زراعت كلزا ریزش دانه می باشد كه بسته به شرایط محیطی باعث هدر رفتن 20 تا 50 درصد محصول می شود. ژن های BnSHP2-b BnSHP2-a BnSHP1 كه عضو خانواده ژنی MADS-b0X می باشند نقش مهمی را در شكوفایی غلاف و ریزش بذر ایفا می كنند. در حالت طبیعی هر كدام از این ژن ها قادر به بروز صفت بصورت مستقل هستند. برای كنترل این صفت نیاز به سازه ای است كه بتواند بیان این ژن ها را همزمان كاهش یا خاموش نماید. برای این منظور یك سازه مولكولی منطبق با اصول كاركرد SiRNA ،miRNA و تلفیق این دو با یكدیگر طراحی گردید كه هر قسمت آن توانایی خاموشی یكی از ژن ها را دارا است و در مجموع این توان را خواهد داشت تا با اثر گذاری بر دو ژن دیگر باعث القاء خاموشی در آنها گردد.

Gene silencing plays a vital role in expression, protection and heritability of eukaryotic genome. Today, the design and synthesis of constructs based on siRNA and miRNA have been developing and lead to produce bifunctional RNAs which are combinations of siRNA and miRNA. Oil seed rape one of the most important oilseed crops in the country. One of the important problems in oil seed rape cultivation is seed shattering that depending on environmental conditions it is account for 20 to 50 percent of yield reduction. The BnSHP1, BnSHP2-a and BnSHP2-b genes, members of MADSbox family, has sensible effects on fruit dehiscence and seed shattering. Normally, each of these genes is able to show this phenotype independently. As a result, a construct which is consistent with the principals and rules of siRNA and miRNA and also a combination of these two methods was designed for their control. The innovation used in designing of these constructs was that any part of these constructs has the ability to silence one of these genes and also has the activity with low efficiency on two other genes and causing silencing induction