بررسي ميزان كارآيي اليگونوكلئوتيد هاي مورد استفاده در الگوي بيان ژني در مراحل اوليه جنين زايي گياه نخود با استفاده از روش نمايش افتراقي

نخود Cicer.aritetinum یكی از گیاهان مهم زراعی در ایران، هند و منطقه مدیترانه می باشد. بهبود ژنتیكی این گیاه با استفاده از تكنیكهای بیوتكنولوژی یكی از روشهای اصلاحی این گیاه میباشد. جنینی زایی بدنی یكی از روشهای پایه ای به طریقه بیوتكنولوژی است. بهبود ژنتیكی این گیاه با استفاده از جنین زایی بدنی به علت پائین بودن فراوانی رخداد این پدیده در نخود با مشكلی روبرو بوده است. امروزه روشهای مولكولی از جمله نمایشی افتراقی (Differentlal Display Or RAP-PCR) برای بررسی الگوی بیان ژن های جنین زایی در مراحل اولیه این گیاه جهت شناخت محدودیتها و رفع نواقصی آن استفاده می شوند. یكی از عوامل موثر در نمایش افتراقی نوع آغازگرهای مورد استفاده است كه بر اساس هدف مطالعه می تواند متفاوت باشد. در این مطالعه تغییرات الگوی بیان ژن با استفاده از آغاز گرهای حاوی سه نوع الیگونوكلئوتیدd TG) dT و dTC dTA)، زمانهای مختلف نمونه برداری (از زمان صفر تا مرحله تشكیل جنین گلبولار) و دو نوع تیمار هورمونی بررسی شد. نتایج آزمایشات نشان داد كه در هر دو تیمار ۲، ۴ - دی و ۲، ۴، ۵- تی بیشترین تعداد باند مربوط به الیگو با الگوی d TC بود، در حالیكه در مورد دو نوع دیگر الیگو در دو تیمار ۲، ۴- دی و ۲، ۴، ۵- تی تعداد باند با الگوی d TG كمتر از الیگو با الگوی dTA بود.

Cheakpea (Cicer.aritetinum.L) is one of the important crops in Iran, India and mediterranean regions. Genetic improvement of cheakpea using biotechnological methods is one of the breeding purposes of this crop and somatic embryogenesis is one of these methods. Genetic improvement of cheakpea by somatic embryogenesis is inefficient because induction frequency of this phenomenon in cheakpea is low. Molecular techniques including differential display or RAP-PCR are used for investigation of gene expression pattern in early embryogenesis for identification of limitation of this method. One of the important factors in differential display is type of primers that can be different on the basis of study goal. Changes in gene expression pattern were studied using dTC, dTA and dTG primers, sampling in different times (from time 0 to globular stage) and two plant growth regulator treatments. The results showed that the highest number of bands was produced by dTC oligonucleotide primer in both hormonal treatments. The number of produced bands in two other oligonucleotides in both hormonal treatments was in order of dTA>dTG.