فراواني ژن‌هاي بتالاكتاماز طيف گسترده در ايزوله‌هاي اشريشياكلي جدا شده از بيماران سرپايي مبتلا به عفونت ادراري در استان گيلان

The Frequency of Beta Lactamase genes in Escherichia coli isolates from outpatient suffering from urinary tract infections in Guilan province

اشريشياكلي رايج ترين عامل عفونت ادراري مي باشد. مقاومت به سفالوسپورين ها به دليل توليد بتالاكتامازهاي طيف گسترده (esbls) اخيراً افزايش يافته است. هدف از انجام اين مطالعه بررسي فراواني ژن هاي ctxm، shv، tem، oxa1، per2 و veb1 در اشريشياكلي جدا شده از نمونه هاي ادراري بيماران سرپايي مبتلا به عفونت ادراري در گيلان بود.مواد و روش ها: تعداد 2267 نمونه ادرار در طول شش ماه از آزمايشگاه هاي منتخب گيلان از بيماران سرپايي جمع آوري شد. ابتدا با تست هاي بيوشيميايي و افتراقي مثل mrvp و دكربوكسيلاسيون ليزين در محيط lia، هيدروليز اوره و tsi، توليد اوره و سيمون سيترات، ايزوله هاي اشريشياكلي شناسايي شدند. جهت تعيين مقاومت دارويي از انتشار ديسك و براي توليد esbl، از ديسك دوتايي با استفاده از ديسك سفترياكسون، آموكسي كلاو و سفتازيديمكلاولونات استفاده شد. بررسي ژن هاي مورد مطالعه در ايزوله ها با pcr و پرايمرهاي اختصاصي هر ژن انجام گرفت.يافته ها: از 2267 نمونه، تعداد 167 ايزوله اشريشياكلي شناسايي گرديدند. بر اساس روش ديسك دوتايي، 38.9% esbl مثبت بودند. بررسي مولكولي نمونه ها نشان داد كه ميزان 70.32% ژن ctxm، 9.64% ژن tem، 4/88 % ژن shv، 57.02% ژن oxa1 و 12.01% ژن per2 را دارا هستند، اما veb1 يافت نشد. تعدادي از ايزوله ها نيز داراي چندين ژن مقاومت به طور همزمان بودند. از نظر آماري بين جنس و سن با اين بيماري و همچنين بين توانايي توليد esbl و وجود ژن هاي مورد بررسي رابطه مستقيم وجود دارد (0.05>p).بحث و نتيجه گيري: در مطالعه حاضر بيش از نيمي از ايزوله هاي اشريشياكلي مولد esbl بودند. با توجه به اينكه عوامل مقاومت روي عناصر ژنتيكي متحرك قرار دارند، شناسايي سريع اين سويه ها مي تواند نقش مهمي در جلوگيري از گسترش آن ها داشته باشد.

Background: Escherichia coli is one of the most common causative agent of urinary tract infection. In recent years، resistance to cephalosporins has been considerably on the rise due to production of extended spectrum beta-lactamases (ESBLs.( This study was aimed to determine the survey of CTX-M، SHV، TEM، OXA-1، PER-2، and VEB-1 which are the most famous ESBL genes in E. coli isolated from outpatients with UTI in Guilan. Materials and Methods: A total of 2267 urine samples were collected from outpatients suffering from UTIs. After primary biochemical and differential tests like MRVP، Lysin dacarboxilation in LIA medium، Urea hydrolysis test، TSI and Simon citrate test، samples containing E. coli were identified. Antibiotic susceptibilities were determined by disk diffusion. Double disk tests using Cephtriaxon، Amoxiclave and Cephtazidime-clavolonate were performed for phenotypic ESBL production assay. ESBL-producing genes were evaluated by PCR. Results: Among the 2267 urine samples، 167 E. coli cells were isolated. From these E. coli isolates، 38.9% were shown to be ESBL producers by the Double disk method. Based on the molecular analysis، the frequency of ESBL-producing genes were، CTX-M (70.32%)، TEM (9.64%)، SHV (4.88%) OXA-1 (57.2%)، and PER-2 (12.1%). VEB-1 was not detected in the analyzed samples. Also، some of the isolates had more than one ESBL-producing gene. Statistically، there was a direct correlation between gender and age with the infection. Conclusion: In this study، more than half of the isolated bacteria were ESBL-producers. As the resistance-inducing genes are carried on mobile genetic elements، rapid detection of resistant species is of major importance to prevent their dissemination.