بررسي اثر جايگزيني miRNA-145 در مهار مهاجرت در سرطان ريه رده سلولي A549

MICRORNA-145 INHIBITS MIGRATION OF HUMAN NON-SMALLCELL LUNG CANCER (A549)

پيش زمينه و هدف سرطان ريه يكي از سرطان هاي رايج و دليل اصلي مرگ به علت سرطان در مردان است و دومين دليل مرگ به علت سرطان در زنان است. در اين تحقيق ما با جايگزيني miRNA-145 در سلول هاي سرطان ريه از طريق انتقال ژن miRNA-145 توسط وكتور، بيان اين miRNA را در اين سلول ها افزايش داديم و اثرات اين miRNA را در مهار متاستاز بررسي كرديم. مواد و روش كار بعد از كشت سلول هاي سرطاني A549 با استفاده از تست MTT، IC50 آنتي بيوتيك Genticin (G418) را در اين رده سلولي به دست آورديم. در ادامه با استفاده از JetPAI انتقال miRNA-145 به داخل سلول هاي سرطان ريه صورت گرفت. از تست qRT-PCR براي تائيد عمل انتقال miRNA-145 به داخل سلول ها استفاده شد. تست Wound healing براي بررسي وضعيت مهاجرت سلول هاي ترانسفكت شده و سلول هاي كنترل استفاده گرديد. يافته ها با استفاده از تست MTT،IC50 به دست آمده براي آنتي بيوتيك Geneticin μg/ml 494.1 شد. نتايج حاصل از تست qRT-PCR افزايش بيان miRNA-145 را در سلول هاي A549 ترانسفكت شده نشان داد. درنهايت نتايج تست Wound healing كاهش مهاجرت سلول هاي ترانسفكت شده را در مقايسه با سلول هاي كنترل نشان داد. بحث و نتيجه گيري نتايج به دست آمده نشان داد كه افزايش miRNA-145 در كاهش متاستاز سلول هاي سرطان ريه رده سلولي A549 نقش دارد.

Background & Aims: Lung cancer is the most common cancer in men and the main cause of male cancer deaths worldwide. Also, it is the second leading cause of cancer deaths in women worldwide. In this study, we replaced miRNA145 in lung cancer cells by vector based miRNA-145, then the level of miRNA expression in these cells increased and we investigated the effects of the miRNA on inhibition of metastasis. Materials & Methods: After A549 cell line culturing, we obtained IC50 of Genticin antibiotic (G418) by using MTT test. In the following miRNA-145 was transferred into lung cancer cells, by using JetPAI. QRT-PCR test was used to confirm the transfer of miRNA-145 into cells. We use wound healing test to check the immigration status of transfected cells and control cells. Results: By using MTT test, the IC50 of Genticin antibiotic was obtained 494.1 μg/ml. The results of the qRT-PCR test showed the increased expression level of miRNA-145 in A549 transfected cells. The wound healing test results showed migration reduction of transfected cells compared to control cells. Conclusion: The results that we obtained shows that increasing miRNA-145 expression level has a role in the reduction of metastasis at lung cancer cell line A549.