مقايسه روش كشت و Multiplex PCR در تشخيص باكتري‌هاي سخت رشد در بيماران مبتلا به عفونت گوش مياني مراجعه‌كننده به بيمارستان امير اعلم تهران

Comparison of culture and multiplex PCR in detection of fastidious bacteria associated with otitis media among suspected patient admitted to Amir-Alam Hospital

سابقه وهدف: عفونت گوش مياني يكي از بيماري هاي شايع در ميان كودكان ميباشد.عوامل مختلفي از جمله باكتري ها و ويروس ها عامل ابتلا به عفونت گوش مياني هستند. شايع ترين باكتري هاي پاتوژن استرپتوكوكوس پنومونيه، هموفيلوس آنفلوانزا، موراكسلاكاتاراليس و استرپتوكوكوس پيوژن هستند.اخيرا الويوكوكوس اوتيتيديس به عنوان يكي از عوامل ايجاد كننده ي اين عارضه شناخته شده است كه مطالعات محدودي به علت سخت رشد بودن و دشواري نمونه گيري بر روي اين باكتري صورت گرفته است. در اين مطالعه بررسي باكتريهاي سخت رشد در بيماران مبتلا به اوتيت مياني به دو روش فنوتيپي و ژنوتيپي انجام شده است. مواد و روش ها: اين مطالعه از نوع توصيفي به مدت 5 ماه از اسفند ماه سال 1392 لغايت تير ماه سال 1393 و بر روي 50 بيمار مراجعه كننده به بيمارستان اميراعلم تهران صورت گرفت. نمونه هاي اخذ شده سپس تحت بررسي هاي فنوتيپي و ژنوتيپي قرار گرفتند. يافته ها: در اين مطالعه به وسيله كشت نمونه ها، تعداد 3 جدايه(6%) آلويوكوكوس اوتيتيديس، 3 جدايه (6%) هموفيلوس آنفولانزه و 1 جدايه (2%) موراكسلا كاتاراليس جداسازي شد. بوسيله تكنيك Multiplex PCR، 25 مورد آلويوكوكوس اوتيتيديس (50%)، 28 مورد هموفيلوس آنفولانزه (56%) و 11 مورد موراكسلا كاتاراليس (22%) در نمونه ها شناسايي شد. نتيجه گيري: باكتري هاي سخت رشد از عوامل مهم ايجاد كننده ي عفونت گوش مياني مي باشند .شناسايي اينها به روش كشت بسيار دشوار است ولي روش Multiplex PCR به مراتب از روش هاي كشت و تست هاي بيوشيميايي دقيق تر، سريع تر و حساس تر مي باشد و مي تواند در زمان كوتاهي پاتوژن هاي مهاجم را بوسيله اين روش شناسايي كرد.

Aims and scope: Otitis media (OM) is a common disease among children. Various factors, including bacteria and viruses are the cause of OM. The most common bacterial pathogens that can cause OM are Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis and Streptococcus pyogenes. Recently, Alloiococcus otitidis is known as one of the causes of OM. For some reasons such as fastidious growth and difficulty in sampling, few studies have been completed on this bacterium. The aim of this study was comparison of culture and multiplex PCR in detection of fastidious bacterial pathogens associated with otitis media. Material & Methods: In this descriptive studies, during a period of 5 month from March 2013 to July 2014, 50 middle ear discharge specimens were collected from patients suspected with otitis media in Amir-Alam Hospital. Samples were assessed by culture and multiplex PCR method. Results: In the study, 3 strains of Alloiococcus otitidis (6%), 3 strains of Haemophilus influenzae (6%) and 1 strain of Moraxella catarrhalis (2%) were isolated by culture. Also, by multiplex PCR method 25 Alloiococcus otitidis (50%), 28 Haemophilus influenzae (56%) and 11 Moraxella catarrhalis (22%) were detected in the samples. Conclusion: Identifying fastidious bacteria with culture method is difficult, but multiplex PCR method is more accurate, faster and more sensitive of culture method and biochemical tests and can be done quickly.