استخراج DNA از ريشه مو با روش نمكي بهينه يافته

DNA Extraction from Hair Roots using Modified Salting out Method

كيفيت و كميت DNA استخراج شده بر نتايج مطالعات ژنتيك مولكولي از جمله واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR)، هضم آنزيمي و غيره تاثير بسزايي دارد. بعلاوه در انتخاب نوع بافت جهت انجام پژوهش هاي ژنوميك علاوه بر كيفيت و كميت DNA استخراج شده، راحت بودن جمع آوري نمونه، هزينه هاي حمل و نقل، ايمن بودن نمونه برداري و پيش فرآوري نمونه ها بايستي مد نظر قرار گيرد. در اين مطالعه روش كارآمد استخراج نمكي بهينه يافته از بافت ريشه ي مو كه مقادير بالاي DNA با كميت وكيفيت مناسب را فراهم مي آورد، معرفي مي گردد. در اين آزمايش جهت استخراج DNAاز 400 نمونه ي مو و 40 نمونه ي خون گاوميش استفاده شد. كميت و كيفيت DNA استخراج شده از هر دو بافت با استفاده از نسبت جذب نوري (260-280 OD) و ژل آگارز 1/2% و واكنش زنجيره اي پليمراز (PCR)، ارزيابي شد. ميانگين ميزان و خلوص DNA استخراج شده از مو به ترتيب 28/12 ميكروگرم و 1/87 بود. اين مقادير براي خون 87/17 ميكروگرم و 1/83 گزارش شد. نتايج ارائه شده در مطالعه ي حاضر و مقايسه ي آن با مطالعات قبلي نشان داد كه روش ساده و بهينه ي ارائه شده در اين بررسي يك روش اقتصادي، راحت، ايمن، كارآمد بوده و قابل توصيه به آزمايشگاه هاي بيوتكنولوژي است.

The reliability and performance of the molecular diagnostic assays such as polymerase chain reaction (PCR), enzyme digestion and other applications are influence by quantity and quality of the extracted DNA strongly. Furthermore, to choose suitable and optimal tissue for genomic experiments nevertheless consider quantity and quality of the extracted DNA, we need to consider the comfort of sample collecting, transporting costs, storing costs, safety of sampling and pre-processing. I this study an efficient salting out-modified procedure for extracting DNA from hair roots, introduced. This procedure yield high quantity of DNA with adequate quality. Four hundred Hair roots and blood samples were obtained from buffalo units experiment. The yield of extracted DNA and the purity of the DNA samples were evaluated by absorbance (A2260/A280) ratio. 1% agar gel electrophoresis and PCR amplification. Mean DNA yields and the 260/280 nm absorbance ratio for buffalo hair roots and blood were 27.67 μg and 1.85 and 17.86 μg and 1.83, respectively. Comparing this results with previous studies demonstrate that our modified procedure is cost-effectiveness, comfortable, safe, efficient and recommendable procedure to carry out in biotechnology laboratories.