بيان ADAMTS-1در سلول‌هاي كومولوس: بيوماركري براي تعيين بلوغ اووسيت

ADAMTS-1 Expression in Cumulus Cells: A Biomarker for Oocyte Maturity

سابقه و هدف: سلول‌هاي كومولوس طي رشد فوليكولي از طريق برقراري ارتباط دوطرفه باعث تنظيم تكامل تخمك مي‌گردد. بيان ADAMTS-1 طي رشد فوليكولي و به‌منظور طبيعي‌نگهداشتن لايه‌هاي سلول‌هاي گرانولوزا كاملاً ضروري مي‌باشد. از ‌آن‌جايي ‌كه مطالعات محدودي در ‌اين ‌زمينه صورت گرفته است، هدف از مطالعه حاضر، بررسي بيان ژن ADAMTS-1 در سلول‌هاي كومولوس انساني و ارتباط احتمالي آن با بلوغ تخمك مي‌باشد. مواد و روش‌‌ها: در مطالعه حاضر 50 زن نابارور (با ميانگين سني 40ـ18 سال) كه به‌دليل انسداد لوله‌اي يا فاكتور مردانه، تحت‌ درمان براي لقاح آزمايشگاهي قرار داشتند، مورد بررسي قرار گرفتند. بلافاصله پس از جداكردن كمپلكس كومولوس- اووسيت، سلول‌هاي كومولوس جدا و درادامه با استفاده از تكنيك RT-PCR وq real time PCR ، ميزان بيان ژن‌هاي ADAMTS-1 و actin-β اندازه‌گيري شدند. يافته‌ها: ميزان بيان ژن ADAMTS-1 در سلول‌هاي كومولوس تخمك‌هاي مچور (MII) در مقايسه با تخمك‌هاي GVبه‌طور معناداري بيشتر بود (p=0.02). شايان‌ ذكر است كه عدد 5/14 به‌عنوان ∆CT cut off pointبراي تعيين نتايج مثبت كاذب و حقيقي به‌دست آمد. علاوه‌براين، حساسيت و ويژگي تجمعي براي بيوماركر مورد ‌مطالعه به‌ترتيب عبارت بودند از: 90 درصد و 67 درصد. نتيجه‌گيري: نتايج مطالعه حاضر نشان داد كه ميزان بيان ADAMTS-1در تخمك‌هاي GVبه‌دست‌آمده، بسيار پايين‌تر از ميزان بيان ADAMTS-1در اووسيت‌هاي رسيده است و ADAMTS-1 مي‌تواند به‌عنوان ماركري اختصاصي در سلول‌هاي كومولوس جدا‌شده از اووسيت در تعيين ميزان بلوغ تخمك مورد استفاده قرار گيرد.

Background and Objective: Cumulus cells regulate oocyte maturation through bilateral communication during follicular growth. Expression of disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type I motifs-1 (ADAMTS-1) is essential for structural remodeling during the follicle growth, to maintain normal granulosa cell layers in the follicles. Since limited studies have been performed on this issue, we aimed to evaluate the expression of ADAMTS-1 in human cumulus cells and the possible correlation between ADAMTS-1 expression and oocyte maturity. Materials and Methods: Fifty infertile women aged 18-40 years undergoing in vitro fertilization (IVF) were recruited. The participants had tubal obstruction and/or their partners were diagnosed with male factor infertility. Cumulus cells were obtained immediately after the isolation of cumulus-oocyte complexes. Adamts-1 and β-actin mRNA expression levels were measured using quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). Results: PCR results showed expression of ADAMTS-1 in cumulus cells. qRT-PCR demonstrated an increased expression of ADAMTS-1 in cumulus cells of mature oocyte compared to the vesicle-stage (GV) oocyte (P=0.02). It is worth mentioning that 5.14 was considered the cut-off point for determining the false and true negative results. Moreover, sensitivity and specificity of the ADAMTS-1 were 90% and 67%, respectively (an area under the ROC curve of 0.8). Conclusion: ADAMTS-1 expression was remarkably lower in GV oocytes than the mature ones, and it can be considered as a specific biomarker in cumulus cells separated from oocytes for determining the rate of oocyte maturation.