اثر چند تركيب مختلف روي فعاليت آنزيم آلفا- آميلاز روده مياني شب‌پره مديترانه‌اي آرد Anagasta kuehniella (Zeller, 1879) (Lep., Pyralidae)

Effect of Different Compounds on Midgut α-Amylase Activity of the Medit erraneanFlour Moth, A nagast a k uehni ella (Zell er, 1879) (Lep. ,Pyralidae)

در اين بررسي اثر هفت نوع تركيب مختلف روي فعاليت آنزيم آلفا- آميلاز روده مياني لاروهاي سن پنجم افراد نر و ماده شب‌پره مديترانه‌اي آرد مطالعه گرديد. ميزان فعاليت ويژه آنزيم با استفاده از كيت تشخيص فعاليت آلفا- آميلاز اندازه‌گيري شد. غلظت پروتئين كل در نمونه‌هاي آنزيمي به روش بردفورد تعيين گرديد. تأثير درجات مختلف اتانول (صفر، 25،50، 75، 85 و 96 درصد) و غلظت‌هاي صفر، 1، 2، 3، 4 و 5 ميلي‌مولار NaCl، EDTA، Tris، SDSنيترات منيزيم و فسفات پتاسيم روي فعاليت آنزيم در لاروهاي نر و ماده بررسي شد. ميانگين‌هاي مربوط به اثر اتانول روي فعاليت آنزيم داراي اختلاف معني‌دار بودند و بيش‌ترين ميزان مهار آنزيم توسط الكل 96 درصد صورت گرفت. فعاليت آنزيم در غلظت‌هاي يك تا پنج ميلي‌مولار NaCl در لاروهاي هر دو جنس داراي اختلاف معني‌دار بود و با افزايش غلظت NaCl ميزان فعاليت آنزيم كاهش يافت. با افزايش غلظت SDS فعاليت آنزيم كاهش پيدا كرد طوري­كه بيش‌ترين فعاليت آنزيم لاروهاي نر و ماده در غلظت يك ميلي‌مولار و كم‌ترين فعاليت در غلظت پنج ميلي‌مولار مشاهده شد. اثر غلظت‌هاي مختلف EDTA روي فعاليت آنزيم در لاروهاي ماده داراي اختلاف معني‌دار بود ولي در لاروهاي نر اختلاف معني‌داري مشاهده نگرديد. اثر غلظت‌هاي مختلف Tris روي فعاليت آنزيم در هر دو جنس داراي اختلاف معني‌دار بود و با افزايش غلظت از فعاليت آنزيم كاسته شد. فعاليت آنزيم در غلظت‌هاي مختلف نيترات منيزيم اختلاف معني‌داري را نشان داد و با افزايش غلظت، ميزان فعاليت آنزيم كاهش پيدا كرد. فعاليت آنزيم در غلظت‌هاي مختلف فسفات پتاسيم در لاروهاي نر و ماده داراي اختلاف معني‌دار بود و با افزايش غلظت از يك به پنج ميلي‌مولار، فعاليت آنزيم افزايش پيدا نمود. آگاهي از چگونگي تأثير مواد مختلف روي فعاليت آنزيم‌هاي آلفا- آميلاز مي‌‌تواند در امر شناسايي و تهيه مهاركننده‌هاي آنزيم‌ها براي كنترل با آفات موثر باشد.

In this investigation, effects of different compounds were evaluated on midgut alpha-amylase activity in maleand female fifth in stars of the Mediterranean flour moth. Enzyme specific activity measured using a specific diagnostic kit for alpha-amylase. Total protein in enzyme samples was determined by Bradford's method. The effects of different degrees of ethanol (0, 25, 50, 75, 85, and 95%) and different concentrations of 0, 1, 2, 3, 4, and 5 mM of NaCl, EDTA, Tris, magnesium nitrate, and potassium phosphate were studied on larval midgut alpha-amylase. The effect of ethanol on enzyme activity was significantly different in male and female larvae and maximum enzyme inhibition occurred by 96% alcohol. Enzyme activity was significantly different in various concentrations of NaCl and it was decreased as NaCl concentration increased. Enzyme activity decreased with increasing SDS concentration and the most activity was observed in male and female larvae at the concentration of 1 mM. The concentration of 5 mM had the lowest activity levels. The effect of different concentrations of EDTA on enzyme activity in female larvae was significantly different but there was no significant difference in males. Different concentrations of Tris, showed a significant effect on enzyme activity of both sexes and enzyme activity decreased due to the increasing of Tris concentration. There was a significant difference among enzyme activities in different concentrations of magnesium nitrate, and enzyme activity decreased when the concentration increased. Enzyme activities in different concentrations of potassium phosphate showed a significantdifference and increased due to the increase of concentration from 1 up to 5 mM. Having good understanding about the mode of action of different compounds on alpha-amylases can help us to identify the enzyme inhibitors and their application in pest control.