بررسي چند شكلي ژن لپتين و ارتباط آن با برخي صفات رشد در گوسفندان نژاد لري بختياري و آميخته لري بختياري- افشاري

Study of the Polymorphism of Leptin Gene and Its Association with some Growth Traits in Lori Bakhtiari and Lori Bakhtiari-Afshari Croessbreed Sheep

هدف پژوهش حاضر، مطالعه چند شكلي ژن لپتين با استفاده از تكنيك PCR- SSCP در گوسفند نژاد لري بختياري و آميخته لري بختياري- افشاري و بررسي ارتباط الگوهاي ژنوتيپي با صفات رشد در گوسفندان لري بختياري بود. از 58 راس گوسفند نژاد لري بختياري نر و ماده موجود در ايستگاه شولي شهركرد و 42 راس گوسفند نژاد آميخته لري بختياري–افشاري از روستاهاي شهركرد خونگيري به عمل آمد. استخراج DNA با كيت شركت سيناژن صورت گرفت. تعيين كيفيت و كميت DNA با ژل آگارز و اسپكتروفتومتري انجام شد. تكثير قطعه 275 جفت بازي اگزون 3 ژن لپتين با استفاده از واكنش زنجيره اي پليمراز صورت گرفت. چندشكلي فضايي تك رشته اي SSCP محصولات PCR با استفاده از ژل پلي اكريل آميد و رنگ آميزي نيترات نقره بدست آمد. هشت الگوي باندي براي گوسفندان لري بختياري با درصد فراواني (97/18)، (35/10)، (17/5)، (89/6)، (37/41)، (35/10)، (45/3) و (45/3) براي الگوهاي 1 تا 8 مشاهده شد. همچنين ده الگوي باندي با درصد فراواني (52/9)، (58/28)، (14/7)، (52/9)، (76/4)، (38/2)، (28/14)، (52/9)، (52/9) (76/4) به ترتيب براي الگوهاي 1 تا 10 براي گوسفندان آميخته لري بختياري– افشاري مشاهده شد. نتايج نشان­ دهنده چندشكلي بالا در ژن لپتين در هر دو نژاد بود. نتايج مقايسه ميانگين نشان از ارتباط معني‌دار ژن لپتين با وزن شش ماهگي و وزن دوازده ماهگي داشت ولي با وزن تولد و وزن از شيرگيري ارتباط معني‌داري در گوسفند لري بختياري نداشت.

The purpose of this study was evaluation of leptin gene polymorphism by PCR-SSCP and its relationship with some growth traits in Lori Bakhtiari and crossbred of Lori Bakhtiari- Afshari sheep. Blood samples were collected from 58 sheep (male and female) of Lori-Bakhtiari in Shahr-e-Kord Sholi station and 42 sheep (male and female) of Lori Bakhtiari-Afshari crossbreed from villages of Shahr-e-Kord. DNA was extracted, using extraction kit of Sinnagen co. Evaluation of quality and quantity of DNA was performed using agarose gel electrophoresis and spectrophotometry. Polymerase chain reaction (PCR) was conducted to amplify 275 bp fragment of exon 3 of leptin gene. Then single strand conformation polymorphism (SSCP) of PCR products was performed and genotypic patterns were obtained using acrylamid gel and silver staining. For leptin gene in Lori bakhtiari sheep, 8 band patterns including L1to L8 and for crossbreeds sheep, 10 band patterns including L1to L10 were obtained. There was a high polymorphism in exon 3 of the leptin gene in both breeds. Also results of means comparison showed that the leptin gene was significantly associated with weight at 6 and 12 months.