مطالعه آسيب شناسي تجربي يرسينيا راكري در قزل آلاي رنگين كمان (Oncorhynchus mykiss)

Pathogenicity of Yersinia Ruckeri in Rainbow Trout ) Oncorhynchus Mykiss)

زمينه مطالعه: بيماري يرسينيوزيس با عامل يرسينيا راكري يكي از بيماري‌هاي مهم باكتريايي صنعت آبزي پروري بويژه آزاد ماهيان بوده و در بين آزاد ماهيان گونه قزل آلا از حساس ترين گونه‌ها محسوب مي‌شود. هدف: اين مطالعه بمنظور ارزيابي تجربي بيماريزايي يرسينيا راكري در قزل‌آلاي رنگين‌كمان انجام شد. روش كار: گروه‌هاي 10 تايي ماهيان در دو تكرار با وزن 100-120گرمي مورد تزريق ميزان ml 1/0 از غلظت Cells/ml 108 از سويه‌هاي باكتريايي به روش داخل صفاقي قرار گرفته و به مدت 20 روز نگهداري شدند. پس از ثبت تلفات روزانه و علائم باليني، حاد ترين سويه انتخاب و به منظور تعيين LD50 تيمارهاي روش تزريقي و حمام شامل رقت‌هاي متوالي 310تا 1010 از سوسپانسيون باكتريايي مذكور طراحي گرديد. همزمان با ثبت تلفات نسبت به تهيه بافت اقدام و ضايعات ميكروسكوپيك مطالعه شد. نتايج: نتايج حاصله ازعلائم باليني و رفتاري شامل بي اشتهايي و بيحالي، شناي چرخشي و نزديك به سطح، تيرگي پوست، اگزوفتالمي، پرخوني و خونريزي‌هاي سرسوزني در نقاط مختلف بدن، پرولاپس مخرج، بزرگ شدن كبد و طحال بود. در مطالعات آسيب شناسي پرخوني عروق و سينوزوئيدهاي كبدي، نكروز و واكوئله شدن هپاتوسيت‌ها، افزايش مراكز ملانوماكروفاژ كليه، اتساع فضاي بومن در گلومرول‌ها، دژنراسيون و نكروز انعقادي لوله‌هاي ادراري، نكروز شديد و كنده شدن پرزهاي روده،‌هايپرپلازي سلول‌هاي اپيتليوم لاملاهاي ثانويه و چماقي شدن آن‌ها ، نكروز سلولي طحال، هيپرپلازي سلول‌هاي جامي و افزايش ضخامت لايه اپيدرم زبان از جمله علايم قابل مشاهده بودند. ميزان LD50 در روش تزريق داخل صفاقي پس از 48 ساعت در غلظت 106× 1.2 سلول به ازاي هر ماهي بدست آمد. در روش حمام نيز ميزان LD50 پس از 96 ساعت در غلظت Cells/mL 108× 5 محاسبه شد. نتيجه‌گيري نهايي: نتايج بدست آمده حاكي از تنوع حدت در سويه‌هاي بومي است.

BACKGROUND: Yersiniosis or enteric redmouth disease (ERM), caused by Yersinia ruckeri, is a serious bacterial disease in the farmed salmonids that causes economic problems in this industry. OBJECTIVES: This study was aimed to assess the experimental pathogenicity of Yersinia ruckeri in Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). METHODS: Two hundred Rainbow trout weighting 100-120 g, challenged with different strain of Yersinia ruckeri were obtained from affected trout farms using intra peritoneal injection route at a concentration of 108 cells/ml (0.1 mL per fish) to evaluate the virulence of these isolates. Each treatment group included 10 fish in two replicates and control fish received 0.1 mL sterile normal saline (0.9% NaCl). Following the intra peritoneal challenge, macroscopic and microscopic findings were determined. The most virulent strain was then used to determine the lethal concentration (LD50) using both intra peritoneal and bath method at dilutions of 103-1010 cells/mL. RESULTS: Macroscopically, anorexia, lethargy, circular swimming near the surface, blackening of skin, exophthalmia, hyperemia and hemorrhage in different parts of body, anal prolapse, enlarged liver and spleen were observed. Microscopically, hyperemia of hepatic sinusoids and vessels, necrosis and vacuolization of hepatocytes, increase in the abundance of macrophage centers in kidney, dilatation of Bowman’s space, degeneration and necrosis of kidney tubules, severe necrosis and detachment of intestinal villi, hyperplasia and clubbing of epithelial cells of secondary lamellae, spleen cell necrosis, goblet cell hyperplasia and thickening of epidermis layer in the tongue mucosa were observed. The LD50 of intra peritoneal injection was calculated 1.2×106cells per fish 48 h post challenge. In bath route, LD50 was obtained 5×108 Cells/ml after 96 h. CONCLUSIONS: The results obtained from this study show virulence diversity of native strains.