ارزيابي روش CarbaNP براي شناسايي سريع ايزوله هاي سودوموناس آئروژينوزا مولد آنزيم هاي كارباپنماز

Evaluation of Carba NP Method for Rapid Detection of Pseudomonas aeruginosa Isolates Producing Carbapenemase Enzymes

سابقه و هدف: اخيرا افزايش مقاومت به آنتي‌بيوتيك‌هاي كارباپنم در بين باكتري سودوموناس آئروژينوزا موجب نگراني‌هايي در بيمارستان‌ها شده است. روش CarbaNP (Cnpt) به منظور شناسايي آنزيم‌هاي كارباپنمازها مورد استفاده قرار مي‌گيرد. بنابراين هدف از اين مطالعه استفاده از روش CarbaNP براي شناسايي سريع ايزوله‌هاي سودوموناس آئروژينوزاي مولد آنزيم‌هاي كارباپنماز مي‌باشد. مواد و روش‌ها: تعداد 97 نمونه باليني از بيمارستان‌هاي آموزشي شهر همدان از آبان 1396 تا ارديبهشت 1397 جمع‌آوري شد.آزمون حساسيت آنتي‌بيوتيكي ايزوله ها به روش ديسك ديفيوژن و حداقل غلظت مهاري نمونه‌ها نسبت به ايميپنم، با استفاده از نوار E test انجام شد. جهت شناسايي آنزيم‌هاي كارباپنماز، از روش CDT (combined disc test)، MHT (Modified Hodge Test) و CarbaNP و روش PCR (Polymerase chain raection ) استفاده شد. در نهايت آناليز آماري تمامي داده‌ها با استفاده ازنرم‌افزار SPSS (Version 16) مورد بررسي قرارگرفت. يافته‌ها: نتايج حاصل از آزمون حساسيت آنتي بيوتيكي نشان داد، بيشترين و كمترين ميزان مقاومت به ترتيب نسبت به آنتي بيوتيك هاي سفترياكسون 65 (67 درصد) و پيپراسيلين-تازوباكتام 38 (2/39 درصد) مشاهده شد، از ميان 97 ايزوله باليني سودوموناس آئروژينوزا، 49 (51/50 درصد) ايزوله با تست PCR براي ژن‌هاي كارباپنماز، مثبت شدند كه از اين ميان 48 (95/97 درصد) ايزوله از نظر تست CarbaNP مثبت بودند.از ميان 48 (48/49 درصد) ايزوله‌اي كه نتايج PCR منفي داشتند، 48 (100 درصد) ايزوله‌ها تست CarbaNP منفي داشتند. بنابراين حساسيت و اختصاصيت اين تست در مقايسه با روش PCR به ترتيب100 درصد و 98 درصد بود. استنتاج: نتايج اين مطالعه نشان داد كه CarbaNP يك روش سريع،ارزان و داراي حساسيت و اختصاصيت بسيار بالايي جهت شناسايي ايزوله‌هاي مولد آنزيم‌هاي كارباپنماز مي‌باشد.

Background and purpose: Recently, increased resistance to carbapenem antibiotics among Pseudomonas aeruginosa has raised concerns. The Carba NP test is used for detection of carbapenemase types. This study aimed at applying Carba NP method for rapid detection of P. aeruginosa isolates producing carbapenemase enzymes. Materials and methods: A total of 97 clinical specimens was collected from patients in educational hospitals between November 2017 and May 2018 in Hamadan, Iran. Antibiotic susceptibility test was performed by disc diffusion method and MIC for imipenem was done by E-test. In order to detect carbapenemases enzymes, combined disk (CDT), CarbaNP, Modified Hodge (MHT), and Polymerase chain reaction (PCR) were performed. Statistical analysis was performed using SPSS V16. Results: The highest and lowest levels of resistance were found to be to Ceftriaxone 65 (67%) and Piperacilin/Tazobactam 38 (39.2%), respectively. Among 97 clinical isolates of P.aeruginosa, 49 (50.51%) were positive for carbapenemase genes by PCR test from which 48 (97.95%) were positive for CarbaNP test. There were 48 (49.48%) PCR negative isolates of which all (100%) showed negative results for CarbaNP test. Compared to PCR, the sensitivity and specificity of this test was 98% and 100%, respectively. Conclusion: This study showed that a high percentage of P. aeruginosa was resistant to Carbapenem antibiotics and the CarbaNP method was highly sensitive and specific for detection of carbapenemase enzymes.