مقايسه اثرات آپوپتوزي عصاره هيدروالكلي برگ گونه هاي مركبات بر تكثير و بقاي سلول هاي سرطاني A549

Comparison of Apoptotic Effects of Citrus Leaves Hydroalcoholic Extracts on Proliferation and Viability of A549 Cancer Cells

سرطان ريه يكي از رايج ترين سرطان ها در دنيا و ايران محسوب مي گردد كه سالانه سبب مرگ افراد زيادي مي گردد. علي رغم تحقيقات فراوان، تابحال درمان مناسبي براي سرطان يافت نشده است. عصاره مركبات داراي تركيبات آنتي اكسيدان فراوان است. در اين تحقيق، اثر سميت عصاره هيدروالكلي برگ گونه هايي از مركبات بر تكثير و بقاي سلول هاي سرطاني ريه رده A549 بررسي و مقايسه شد. عصاره برگ مركبات با دستگاه سوكسله تهيه گرديد. سلول هاي A549 تكثير و سپس به مدت 72 ساعت، با غلظت هاي 5/0 تا 10 ميلي گرم بر ميلي ليتر عصاره ها تيمار شدند. در زمان هاي معيني بعد از تيمار، بقاء و مورفولوژي سلول ها با استفاده از تست MTT و رنگ آميزي آكريدين اورنج ارزيابي شد. در اين آزمايش غلظتي از عصاره كه 50 درصد بقاي سلولي را كاهش داد به عنوان IC50 براي هر نمونه در نظر گرفته شده كه به ترتيب شامل 2، 6 و 8 ميلي گرم بر ميلي ليتر براي عصاره برگ ليموترش، پرتقال و نارنج به دست آمد. همچنين سلول هاي آپوپتوز يافته در گروه تيمارشده با عصاره برگ ليمو نسبت به عصاره برگ نارنج و پرتقال به طور معني داري (P<0.05) بيشتر بود و همچنين تعداد سلول هاي آپوپتوزي در نمونه تيمارشده با عصاره برگ پرتقال به طور چشم گيري (P<0.05) بيشتر از نارنج مشاهده شد. عصاره هيدروالكلي مرگ ليموترش، پرتقال و نارنج قادر هستند آپوپتوز را به صورت وابسته به دوز و زمان در سلول هاي A549 القاء كند.

Lung cancer is one the most common cancer in the world and Iran that lead to many deaths. Despite abundant researches, an appropriate cure has not been yet found for cancer. Citrus extract contains abundant anti-oxidative compounds. In this research evaluated and compared the toxic effect of Citrus leaves hydroalcoholic extracts on the proliferation and viability of A459 cancer cells. Citrus leaves extracts were prepared by soxhlet set. A549 cells were proliferated and treated with 0.05-10 mg/ml concentrations of extracts for 72h. Cell viability and morphology were evaluated by MTT assay and acridine orange staining on certain times after treatment. Comparison of the cell viability percent in experimental groups indicated that IC50 were 2, 6, and 8 respectively for Citrus limon, Citrus reticulata, and Citrus aurantium leaves extract (P<0.05). Also, number of apoptotic cells was significantly (P<0.05) more in C.lemon group than C. reticulata and C. aurantium group and indeed, number of apoptotic cells were significantly (P<0.05) more in C. reticulata group than C. aurantium group. Citrus leaves hydroalcoholic extract can induce apoptosis in A549 cells in a dose and time-dependent manner